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細胞污染常見原因
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無菌觀念薄弱，穿戴不注意 1 進細胞房不換鞋，不戴口罩，不戴手套，是細胞房的大忌諱！有更嚴格的細胞房連帽子都要戴上。為什么呢？換鞋是為了隔離真菌。戴口罩是為了防止口腔支原體不會污染細胞了。不戴手套，根本就清除不掉你手上的細菌真菌，要不你試試看拿火燎一下你的手，焦了才算滅菌。 紫外線和酒精滅菌，不能亂用 2 能滅菌，但是紫外和酒精最多只能滅細菌，對真菌傷害很小。你不戴手套，僅用噴壺噴手是沒有什么用的。超凈臺為什么盡量要用酒精棉球而不是用酒精噴壺呢？因為用酒精棉球的話，可以在滅菌的同時把菌體從手上擦下去。而噴壺只能短暫滅菌而已，所以要多用棉球，少用噴壺。 使用生物安全柜，別超安全線 3 生物安全柜的玻璃窗是有警戒線的，超過這個警戒線，生物安全柜的風(fēng)簾就起不到太大作用，且會引入室內(nèi)空氣中的真菌，比如你的臭鞋里的酵母啥的。還會讓你給細胞送溫暖的呼吸里，自動帶上支原體。 拿細胞培養(yǎng)瓶的時候不注意操作 4 用細胞培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)的時候，最忌諱的是你拿瓶子的時候，手拿著有蓋子的那一面。因為一般來說瓶蓋開關(guān)是最容易接觸到瓶口的，你手拿著培養(yǎng)瓶，那手的虎口夾縫里所含有的真菌很容易就接觸到瓶蓋上，一旦造成污染，就是很嚴重的。 實驗用品亂擺放 5 生物安全柜里操作的時候，門前最忌諱堆一堆雜七雜八的東西，槍頭盒、血清、管子，培養(yǎng)皿、移液器、酒精噴壺、酒精燈，堆了一大堆。有的都堵住了安全柜門前的出風(fēng)口。一來會導(dǎo)致操作起來并不是井井有條，會導(dǎo)致動作幅度過大，擾亂氣流。二來這些東西一旦擋住風(fēng)口，也會擾亂生物安全柜的氣流，氣流變化會導(dǎo)致外部不潔凈的空氣流入，也同樣會導(dǎo)致生物安全柜的潔凈作用失效。 不注意清潔水浴鍋 6 水浴鍋是比較容易忽視的，復(fù)蘇細胞的時候，37℃，對細菌真菌來說這就是溫床啊。復(fù)蘇完，濕漉漉的凍存管，任你再怎么噴酒精也并沒有什么意義了。那要怎么辦，水浴鍋一來是定期清潔，二來是加一些抑菌劑。注意：不是讓你往里面加雙抗！水浴鍋里要加2%的硫酸銅，但這個是比較容易腐蝕水浴鍋的，所以定期也要更換清潔。 水盤污染 7 培養(yǎng)箱的水盤也是坐擁37℃溫床的水環(huán)境。水盤里若是飄著特別大的一塊塊霉斑。一污染就一箱子全報廢了，培養(yǎng)箱要定期用0.1%的新潔爾滅或者84清洗（交替使用，防止微生物耐藥）。水盤也一樣，水盤中加入飽和的磷酸氫二鈉可以有效預(yù)防細菌真菌，但是需要定期加入去離子水防止析出。 滅菌滅不好 8 細胞房所使用的槍頭，必須要經(jīng)過濕熱滅菌， 用報紙包裹好槍頭，是因為滅菌鍋一般在細胞房外面，所以要保證內(nèi)部槍頭盒結(jié)晶�？靖墒菫榱朔乐箖�(nèi)部有水分，當你開啟槍頭盒后，有水的地方更容易被霉菌的孢子所接觸附著，也就更容易污染。所以這個也必須要注意！ 作者：畢合生物 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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