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合肥肽庫(kù)生物新蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[交流]
流動(dòng)相選擇甲醇還是乙腈？
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乙腈/水和甲醇/水是反相色譜中最常見(jiàn)的流動(dòng)相組成。那么是甲醇好還是乙腈好呢？ 當(dāng)然，這個(gè)問(wèn)題并沒(méi)有一個(gè)確定的答案。兩者的選擇性差異可能對(duì)色譜分離起到重要的作用。例如，一些溶質(zhì)可以形成甲醇鹽，而乙腈可以穩(wěn)定八面體銅離子、鎘離子和鋅離子絡(luò)合物。下面列出了兩種溶劑的一般差異： 乙腈具有以下特點(diǎn)： 低黏度 更好的動(dòng)力學(xué)。 相比于甲醇/水混合液，乙腈/水混合液具有更低的背壓。 洗脫能力強(qiáng) 空氣的溶解度低 紫外吸收率低（液相檢測(cè)方法） 在水溶液中只有較小的pH偏差 乙腈是較好的溶劑化試劑 與甲醇相比，乙腈與水的化學(xué)性質(zhì)差異更大 比甲醇毒性更大 在低pH條件下更有利于堿的分離 由于乙腈具有上述的特點(diǎn)，因此具有以下優(yōu)勢(shì)： 色譜峰尖銳 對(duì)密封件和色譜柱的磨損較少 較低的溶劑消耗：與甲醇相比，在較低的乙腈百分比下就會(huì)有相同的洗脫強(qiáng)度（即洗脫能力強(qiáng)） 與含甲醇的流動(dòng)相相比，硅膠在含乙腈的流動(dòng)相中更不容易被溶解(乙腈的極性小于甲醇) 空氣殘留更少，脫氣更加容易 在195 ~ 200 nm檢測(cè)效果較好（液相檢測(cè)方法） 特別是對(duì)離子型化合物的分離具有更好的重現(xiàn)性 離子色譜選擇性差異更容易獲得 微生物在系統(tǒng)中的生長(zhǎng)受到阻礙 甲醇具有以下特點(diǎn)： 甲醇/水混合液使密封件更快地進(jìn)入其溶脹狀態(tài) 氣味較輕，且毒性較小 對(duì)鹽類有更好的溶解性（如流動(dòng)相添加劑中的甲酸銨/乙酸銨等） 在較老批次的乙腈中，雜質(zhì)(丙烯腈、甲基丙烯腈)會(huì)產(chǎn)生"鬼影"峰。而對(duì)于甲醇來(lái)說(shuō)，該問(wèn)題知之甚少。 在堿性pH下更有利于堿的分離 甲醇/水混合液中220 ~ 230 nm以上的基線噪聲較低。（液相方法檢測(cè)） 其優(yōu)點(diǎn)主要為： 設(shè)備更快進(jìn)入工作狀態(tài)， 甲醇的存放期更長(zhǎng) 更好的工作環(huán)境 對(duì)人員更加友好 即使在100 %甲醇的梯度條件下，鹽類析出的危險(xiǎn)性也較低 結(jié)論：顯然，對(duì)于大多數(shù)用戶來(lái)說(shuō)，乙腈的利大于弊。大約70 %的反相分離中使用乙腈。顯然，對(duì)于大多數(shù)用戶來(lái)說(shuō)，乙腈的優(yōu)勢(shì)大于劣勢(shì)。大約70 %的反相分離中使用乙腈。但是在實(shí)際過(guò)程中，不同化合物在甲醇和乙腈的離子化能力不一樣；同時(shí)由于乙腈的洗脫能力較強(qiáng)，在某些難分離的樣本中，乙腈可能無(wú)法分開(kāi)所有的分析物。因此，我們?cè)趯?shí)際分析過(guò)程仍需要結(jié)合實(shí)際情況，多加嘗試。 附：甲醇的致死量為30毫升，乙腈的致死量為5毫升，所以乙腈的毒性會(huì)更大一些。兩者中毒的癥狀如下：乙腈中毒會(huì)出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、胸悶、胸痛、疲倦、乏力等癥狀，嚴(yán)重時(shí)也出現(xiàn)呼吸抑制、血壓下降、昏迷、抽搐等。其脈搏心率皆減慢，呼吸亦較慢，面色多呈蒼白，常引起蛋白尿等腎臟損傷表現(xiàn)。甲醇主要作用于神經(jīng)系統(tǒng),具有明顯的麻醉作用,可引起腦水腫。甲醇在體內(nèi)抑制某些氧化酶系統(tǒng)，抑制糖的需氧分解，造成乳酸和其他有機(jī)酸積聚以及甲酸累積,而引起酸中毒。 |
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