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百事可愛66新蟲 (小有名氣)
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干貨分享 | 糖原染色法
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PAS染色全稱為過碘酸雪夫氏染色（schiff periodic acid shiff, PAS），又稱糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。 染色原理：細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基，其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色，沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。 染色步驟 1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水，蒸餾水洗2min（細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）； 2.滴加過碘酸溶液，氧化5min； 3.蒸餾水洗10min； 4.滴加Schiff試劑，侵染10-20min； 5.傾去Schiff 試劑，流水沖洗10min； 6.滴加蘇木素染色液，染核1-2min； 7.流水沖洗5min； 8.酸性乙醇分化液分化； 9.Scott反藍(lán)水洗3min； 10.常規(guī)透明、封片。 糖原、多糖類物質(zhì)及其他PAS反應(yīng)陽(yáng)性物質(zhì)呈紫紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。 注意事項(xiàng) 高碘酸溶液為透明溶液，配制后放4度冰箱備用，無法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞，需要定期更換； 染色試劑均應(yīng)低溫保存，臨用前半小時(shí)取出恢復(fù)室溫； Schiff染液染色時(shí)間可隨溫度調(diào)整，室溫高可減少染色時(shí)間，冬季室溫低，可延長(zhǎng)至20 min左右。 |
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