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短短幾十年新蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量的兩次結(jié)果相差太大
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各位貼友們好，目前在做基因干擾，用的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染構(gòu)建的干擾RNA質(zhì)粒（細(xì)胞是3T3-L1），把干擾后的細(xì)胞收完之后提Rna，之后反轉(zhuǎn)錄做熒光定量。但是同一個(gè)Rna模板反轉(zhuǎn)錄的，用同一個(gè)引物做的定量結(jié)果，結(jié)果兩次定量分析結(jié)果相差較大，這是問題1。然后空白對(duì)照和陰性對(duì)照的基因表達(dá)量也相差挺大的，這是問題2。 整個(gè)實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)染是導(dǎo)師做的，我今年研一，她怕我做不好。然后后面的提取Rna，反轉(zhuǎn)錄，熒光定量是我做的。結(jié)果不理想，導(dǎo)師老是問我為啥會(huì)這樣，我其實(shí)真的不知道，都是按照步驟來的…… 各位親們有沒有遇到類似的情況，有的話請(qǐng)不吝指教，拜謝了！ |
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