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隨心行0912新蟲 (初入文壇)
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[求助]
酶動力學參數(shù)擬合時試驗點后半部分逐漸下降
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想請教下大家有無遇到過這種情況，隨著底物濃度增加，反應速度先逐漸增加，到達峰值時隨濃度增加開始下降(如圖嗚嗚嗚啊圖傳不上去 ，一般來說應該是不變的對吧)，我的酶是谷氨酸脫羧酶，對pH的依賴程度很強（偏酸性，且pH適應范圍比較窄及酶活較高的范圍比較窄），一開始懷疑是由于后期底物濃度高了加的底物母液改變了體系的pH，于是第三次（前面測了兩次，第一次出現(xiàn)這種情況后第二次翻倍了母液濃度試圖降低體系里底物液占比，但后面還是會下降）直接配好底物液體后把他用酶活體系中酸調成了偏酸性再次反應，但測出來的結果依然后面會下降，請問大家遇到過這種情況嗎？都是如何處理的？謝謝大家~（其實測了三次感覺Vmax和Km也算能看出來了感覺，大家怎認為？歡迎討論！） |
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