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孫韋地新蟲 (初入文壇)
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[交流]
轉(zhuǎn)化子假陽性 已有3人參與
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| 自己PCR加his標(biāo)簽,雙酶切連接之后熱激轉(zhuǎn)化,轉(zhuǎn)化子假陽性是為什么呀?轉(zhuǎn)化之后測序序列比對和目的片段不匹配,和載體匹配,說明載體和片段沒連上,但是菌P驗證的時候電泳膠上面有明亮的條帶,用的感受態(tài)細(xì)胞是MC1061,載體是PNZ8148 |
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轉(zhuǎn)化后涂平板挑菌做的嗎?有可能是沒連上但是你的平板表面有散落的目的片段,導(dǎo)致菌檢擴(kuò)增有條帶但測序沒有目的片段 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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his標(biāo)簽比較小吧,你確定菌p是his不是引物二聚體?有把菌p的進(jìn)行膠回收送測看看嘛?確定是his的基因?你都送測沒有檢測到his的基因,his基因怎么可能單獨存在菌里面,也許你沒有連his的菌說不定也能p出來條帶呢 發(fā)自小木蟲手機(jī)客戶端 |
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