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涼宮春日?qǐng)F(tuán)長(zhǎng)新蟲 (初入文壇)
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[求助]
PCR的線性質(zhì)粒片段連接不上 已有3人參與
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我想去除質(zhì)粒上的十幾個(gè)堿基,所以在這十幾個(gè)堿基的兩端設(shè)計(jì)了引物,然后加上同一個(gè)酶切位點(diǎn),計(jì)劃酶切后直接連接,讓酶切后的PCR線性質(zhì)粒連接成環(huán)。用的sal1酶切位點(diǎn),連接用的T4。 連接產(chǎn)物跑膠后,只看到了線性質(zhì)粒條帶,沒有環(huán)狀的。菌落PCR也沒有陽性的。 各位大佬有做過的嘛,可以指點(diǎn)一下嗎。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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