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liu'xian新蟲 (初入文壇)
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免疫熒光
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免疫熒光 免疫熒光(IF) Coons等于1941年首次采用熒光素進(jìn)行標(biāo)記而獲得成功，這種以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)稱為熒光抗體技術(shù)(luorescentantbodytechnioue)。用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法:用已知的英光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法，這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù) 因?yàn)闊晒馍夭坏媾c抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測(cè)或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測(cè)或定位抗體 但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣稱為熒光抗體技術(shù)或稱為免疫熒光技術(shù)，以熒光抗體方法較常用。11用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細(xì)胞(感組織)化學(xué)技術(shù) 原理 免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原 抗體反應(yīng)，由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時(shí),只要知道其中的一個(gè)因素 就可以查出另一個(gè)因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)近在抗體/感原 與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后 在帶光易微鏡下呈現(xiàn)一種特導(dǎo)性帶光反應(yīng)。 直接法 將標(biāo)記的特異性熒光抗體直接加在抗原標(biāo)本上,經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色,用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體。室溫下干燥后封片、鏡檢 間接法 如檢查未知抗原,先用已知未標(biāo)記的特異抗體(第一抗體與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng) 用水洗去未反應(yīng)的抗體 再用標(biāo)記的抗抗體(第二抗體與抗原標(biāo)本反應(yīng),使之形成原一抗體一抗體復(fù)合物,再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體 干燥、封片后鏡檢，如果檢查未知抗體,則表明抗原標(biāo)本是已知的,待檢血清為第一抗體 其它步的抗原檢查相同，標(biāo)記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性 如免疫抗雞血清球蛋白只對(duì)雞的球蛋白發(fā)生反應(yīng),因此,制備標(biāo)記抗體適用于雞任何抗原的診斷。 |
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