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舒克舒孟德新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助關(guān)于pcr假陽性和重組質(zhì)粒一些問題
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重構(gòu)質(zhì)粒后跑了菌液pcr，但是沒用通用引物跑，而是自己的引物，結(jié)果跑出來?xiàng)l帶和目標(biāo)相符，送去測(cè)序發(fā)現(xiàn)是空載 那么有兩種可能，1. 引物被模板污染 2. 假陽性 但是假陽性為什么會(huì)跑出和目的基因大小一樣的片段呢，是兩端都有黏附么。模板污染也不太對(duì)，之前有沒跑出來的。 空載的原因：1.沒連接上 2.挑菌沒挑到 關(guān)于快切酶時(shí)間和T4鏈接時(shí)間，我切了兩個(gè)小時(shí)，連了6個(gè)小時(shí)，有沒有可能是沒連上呢 求助分析一下原因 |
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