 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1385 | 回復(fù): 5 | |||
[交流]
內(nèi)毒素與外毒素的區(qū)別，內(nèi)毒素檢測及去除方法
|
|||
|
本文主要介紹內(nèi)毒性，及其毒性反應(yīng)。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分，叫做脂多糖。內(nèi)毒素只有當細菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細胞后才釋放出來，所以叫做內(nèi)毒素。內(nèi)毒素耐熱而穩(wěn)定，抗原性弱。在100℃的高溫下加熱1小時也不會被破壞，只有在160℃的溫度下加熱2到4個小時，或用強堿、強酸或強氧化劑加溫煮沸30分鐘才能破壞它的生物活性。內(nèi)毒素不是蛋白質(zhì)，因此非常耐熱。 內(nèi)毒素與外毒素的區(qū)別 內(nèi)毒素與外毒素不同之處在于：內(nèi)毒素不能被稀甲醛溶液脫去毒性成為類毒素；把內(nèi)毒素注射到機體內(nèi)雖可產(chǎn)生一定量的特異免疫產(chǎn)物（稱為抗體），但這種抗體抵消內(nèi)毒素毒性的作用微弱。 內(nèi)毒素檢測方法 1、 凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時應(yīng)加除熱原水（細菌內(nèi)毒素檢查用水）復(fù)溶后使用。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點。此法操作比較簡單，經(jīng)濟，不需要專用測定設(shè)備，可以進行定性或半定量測定。 2、動態(tài)濁度法、終點濁度法、動態(tài)顯色法、終點顯色法，這四種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的。根據(jù)檢測原理，終點濁度法和動態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。終點濁度法未見商品化產(chǎn)品。動態(tài)濁度法（又稱動態(tài)比濁法）是檢測反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時間，或是檢測濁度增加速度的方法。 3、終點顯色法和動態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度，又稱為比色法。 內(nèi)毒素去除方法 1、超濾膜和荷電微孔濾膜法 由于內(nèi)毒素具有較大的相對分子質(zhì)量，因此可選用超濾膜去除水中的內(nèi)毒素。超濾膜的孔徑及材質(zhì)的選擇，需視被處理藥物的相對分子質(zhì)量、特性、及藥品中熱原的含量而定。如要截留大部分熱原，需采用截留相對分子質(zhì)量為5000或10000的超濾膜，此時操作過程中的壓力較高，另外對部分含有較大相對分子質(zhì)量成份的醫(yī)藥制劑也不合適。因為在除去熱原的同時會阻留或吸附藥液中的有效成份，使產(chǎn)品收率大受影響。 由于內(nèi)毒素分子在中性條件下本身帶負電荷，因而選擇帶有正電荷的材質(zhì)如聚砜、聚丙烯腈、聚酰胺等微孔濾膜可增強對內(nèi)毒素分子的去除效果，另外，也有人將硅藻土涂漬在纖維素膜上，然后在其上吸附上荷正電聚電解質(zhì)，用于去除內(nèi)毒素。但這些荷電微孔濾膜對內(nèi)毒素的去除效果受pH的影響較大。 2、石棉及活性炭吸附法 活性炭用于去除內(nèi)毒素是由于內(nèi)毒素的相對分子質(zhì)量較大，這種方法適合于組分較為簡單的小分子的溶液中或水中內(nèi)毒素的去除。比較適合純水溶液中內(nèi)毒素的去除。但由于活性炭的選擇性較差，易吸附有效成份，且純化后溶液中的殘余活性炭不易去除，因此目前已很少使用。 3、化學降解法 化學降解法是指用強酸、強堿或氧化劑等使內(nèi)毒素降解以達到去除內(nèi)毒素的目的，主要用于玻璃、塑料和其它高分子材料器皿上內(nèi)毒素的去除。這種方法有可能造成目標產(chǎn)物的流失、降解或失活，因此對于具有生物活性物質(zhì)溶液中的內(nèi)毒素去除顯然是不利的。 4、相分離法 Liu等發(fā)展了一種采用Triton X-114從大量重組體蛋白制品中去除內(nèi)毒素的方法。據(jù)此文報道，利用這種相分離法，對內(nèi)毒素的去除率達99%以上，對蛋白質(zhì)的回收率大于90%，且不影響有效成份的活性。 5、離子交換色譜法 離子交換色譜法是根據(jù)內(nèi)毒素帶有部分負電荷的性質(zhì)，用陰離子交換色譜來去除內(nèi)毒素，但這種方法不適合于溶液中存在其它帶負電荷物質(zhì)的情況。如二乙基胺乙基（DEAE）陰離子交換介質(zhì)適于從堿性蛋白質(zhì)中去除內(nèi)毒素，成本低，吸附容量大。Chibata等人采用一種以吸附劑吸附溶液中的內(nèi)毒素的方法去除內(nèi)毒素。吸附劑由不溶于水的載體（如Cellulose）和含氮雜環(huán)的化合物（R-A-X）組成，其中R是含氮雜環(huán)基團，A是烷基或鏈烯基，X是H原子或作用基團。含氮雜環(huán)和烷基可由一個或多個取代物選擇性取代，此化合物直接或通過間隔臂連接到載體上。 6、親和色譜法 親和色譜法是利用物質(zhì)的生物學特性來達到物質(zhì)的分離，是去除內(nèi)毒素的一種較為理想的方法。只要采用適當?shù)呐浠瑢⑺梯d于親和色譜的基質(zhì)上合成出親和介質(zhì)，就可使它成為一種去除內(nèi)毒素的高效能、高選擇性方法。相對于上述方法來說，親和色譜法具有其顯著的優(yōu)越性，去除率高、選擇性好。 自80年代起，組胺、組氨酸就開始用作去除內(nèi)毒素的親和配基。Satoshi Minobe報道，以組氨酸為配基的柱介質(zhì)在低離子強度（I = 0.02），pH 3 ~ 8的條件下，對內(nèi)毒素的去除效果最好。商振華等在此基礎(chǔ)上制成了以組氨酸為配基的聚酰胺膜介質(zhì)，在所選擇的最佳條件下成功地應(yīng)用于BSA、溶菌酶等生物制劑中內(nèi)毒素的去除。Legeklallails等則成功地利用組氨酸為配基的中空膜（PEVA）去除了IgG中的內(nèi)毒素。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
材料與化工求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
298求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
288求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0856材料與化工290求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級已過，英語能力強
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
22408 275分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
324求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
303求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
接受26屆調(diào)劑生
已經(jīng)有18人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
江西師范大學陶端健教授團隊2026年碩士研究生招生公告
+1/229
-
[求助]日本動漫里用手表和三角板測經(jīng)緯度是怎么回事？
+1/188
-
湖北省楚天學子教授團隊招收專碩和學碩士6名
+5/110
-
面對核三廢，威格屏蔽手套箱如何筑牢第一道安全防線？
+1/90
-
CSC國家公派-創(chuàng)新型人才國際培養(yǎng)項目-每年7人-新加坡南洋理工大學-武漢大學-校內(nèi)選拔
+1/89
-
Journal of Environmental Management投稿
+1/87
-
東北農(nóng)業(yè)大學—水利學院，招收農(nóng)業(yè)水土工程、土木水利碩士研究生
+1/84
-
青島科技大學高分子學院李明杰老師招收高分子材料方向碩博士研究生，歡迎聯(lián)系！
+1/45
-
全獎！|澳大/港理工與中科院先進院招收2026FALL電氣、電力電子、暖通方向聯(lián)培博士！
+1/30
-
美國密蘇里大學“柔性電子”課題組誠聘博士和博士后
+1/25
-
招博士，申請考核制，環(huán)境化學、理論計算、環(huán)境毒理/健康方向
+1/24
-
雙一流天津工業(yè)大學電信學院李鴻強教授招收2026年申請審核制博士
+1/8
-
0858電氣專碩364求調(diào)劑
+1/5
-
Top-88悉尼科技大學數(shù)據(jù)科學/AI 招收2027年入學 校獎 博士生1到2名(國際和本地學生）
+1/5
-
【博士招生】北方工業(yè)大學招收 機械工程方向 申請考核制博士
+1/5
-
-分子探針等化學/生物方向博士后和研究助理
+1/4
-
北京高校副校長團隊招收機械類，環(huán)境類學碩和專碩
+1/4
-
120202南京大學企業(yè)管理求調(diào)劑
+1/3
-
徐工-環(huán)境工程學院-招收調(diào)劑碩士
+1/2
-
中國石油大學（華東）化工類碩士招生
+1/1
簡單回復(fù)
tzynew2樓
2023-02-07 15:43
回復(fù)
專注多肽(金幣+1): 謝謝參與
k 發(fā)自小木蟲Android客戶端
nono20093樓
2023-02-07 23:02
回復(fù)
專注多肽(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
XG-WUST4樓
2023-02-08 22:14
回復(fù)
專注多肽(金幣+1): 謝謝參與
up 發(fā)自小木蟲IOS客戶端
2023-02-08 22:23
回復(fù)
專注多肽(金幣+1): 謝謝參與
2023-02-12 10:04
回復(fù)
專注多肽(金幣+1): 謝謝參與
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 合肥肽庫生物 的主題更新
| 6 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 083000，總分284，求調(diào)劑 +5 | 徐yr 2026-03-04 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研]
 調(diào)劑的同學，走過路過，不要錯過
+8
|
likeihood 2026-03-06 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇大材料工程專碩293求調(diào)劑 +4 | 鋼鐵大炮 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
[考研] 322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國金及主持省級大創(chuàng)經(jīng)歷 +4 | 熊境喆 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08工科 +4 | li李樂成 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調(diào)劑學校 +3 | 一志愿京區(qū)211 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 +5 | G212 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿山東大學105500藥學專碩，總分302求調(diào)劑 +4 | 五維天空 2026-03-04 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +4 | 劉合華 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 080500材料科學與工程 +13 | 202114020319 2026-03-03 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +4 | L9370 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +5 | Bananaiy 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境調(diào)劑 +7 | 柒槿levana 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國金及主持省級大創(chuàng)經(jīng)歷 +6 | 熊境喆 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 成績276，專業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +10 | 小陳朵 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學 一志愿東北大學 279分求調(diào)劑 +4 | 聶樂平 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | kkcoco25 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 清華大學 材料與化工 353分求調(diào)劑 +5 | awaystay 2026-03-02 | 6/300 |
|