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2280ke銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
造模方法：功能性腹瀉脾虛證動(dòng)物模型
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【建模材料】 1、動(dòng)物 健康雄性Wistar大鼠135只，清潔級(jí)，3周齡。 2、飼料 基礎(chǔ)配方飼料成分為酪蛋白18%，淀粉58.8%，蔗糖10%，玉米油5%，纖維素3%，維生表3%，無機(jī)鹽4%，蛋氨酸0.2%高乳糖飼料是將基礎(chǔ)飼料中的淀粉全部改為乳糖。 3、試劑 淀粉酶檢測(cè)試劑盒、乳酸、D-木糖檢測(cè)試劑盒。 4、器材: 自制水環(huán)境小平臺(tái)站立箱，箱體為112cmx62cmx41cm，箱內(nèi)設(shè)置了15個(gè)小平臺(tái)，平臺(tái)直徑8cm，高10cm，平臺(tái)周邊注水，水深1.5cm，水溫維持在22+2度。木質(zhì)礦場(chǎng)箱(100cmx100cmx40cm為立方形，內(nèi)側(cè)壁及底面為灰色，用黑線劃分為25格，每格形制均為20cmx20cm，沿側(cè)壁的格稱為外周格(16個(gè)周邊正方形)，其余為中央格(9個(gè)中心正方形)。正中格正上方安詈攝像頭，ACS-ZEAS型電子秤，游泳桶，高速冷凍離心機(jī)，酶標(biāo)儀。【建模方法】 1、方法及造模 健康雄性Wistar大鼠120只，清潔級(jí)，3周齡，購進(jìn)動(dòng)物先進(jìn)行3天活應(yīng)性飼養(yǎng)。40W日光燈照射8:00-20:00，室內(nèi)溫度控制在22.0-24.0度，保持安靜，單籠飼養(yǎng)。常規(guī)鼠類飼料喂養(yǎng)。隨機(jī)分為7組，分別為空白對(duì)照組、游泳組、水環(huán)境小平臺(tái)站立組(簡(jiǎn)稱小平臺(tái)站立組)、游泳加水環(huán)境小平臺(tái)站立組、高乳糖飼料喂養(yǎng)組(簡(jiǎn)稱高乳糖組、高乳糖飼料加游泳組(高乳糖加游泳組)、高乳糖飼料加水環(huán)境小平臺(tái)站立組(高乳糖加小平臺(tái)站立組)�？瞻讓�(duì)照組(n=15):基礎(chǔ)配方飼料喂養(yǎng)。 游泳組(n=15):基礎(chǔ)配方飼料喂養(yǎng)，每天進(jìn)行游泳，以力竭為度。 小平臺(tái)站立組(n=15):基礎(chǔ)配方飼料喂養(yǎng)，每日8:00-次日8:00置入水環(huán)境小平臺(tái)站立箱。 游泳加小平臺(tái)站立組(n=15);基礎(chǔ)配方飼料喂養(yǎng)，每日游泳，力竭為度，18:00-次日8:00詈入水環(huán)境小平臺(tái)站立箱，高乳,精組(n=15):高乳糖飼料噴養(yǎng)。 高乳,糖加游泳組(n=15):高乳,糖飼料喂養(yǎng)，每日游泳，力竭為度。 高乳糖加小平臺(tái)站立5h組(n=15);高乳糖飼料喂養(yǎng)，每日7:00-12:00詈入水環(huán)境小平臺(tái)站立。高乳糖加小平臺(tái)站立9h組(n=15):高乳糖飼料喂養(yǎng)，每日22:00-次日7:00置入水環(huán)境小平臺(tái)站立高乳糖加小平臺(tái)站立14h組(n=15);高乳糖飼料喂養(yǎng)，每日18;00-次日8;00詈入水環(huán)境小平臺(tái)站立造模14天，第15天每組隨機(jī)取10只取材，剩余大鼠每天基礎(chǔ)配方飼料飼養(yǎng)，觀察模型持續(xù)時(shí)間。 2、觀察指標(biāo) 每天對(duì)動(dòng)物模型進(jìn)行觀察記錄，從動(dòng)物外觀表征，糞便情況，結(jié)合體重，攝食量，飲水量等對(duì)大鼠進(jìn)行觀察，并進(jìn)行腹瀉指數(shù)記錄方法如下:大鼠單個(gè)放在熱有浦紙的鼠籠內(nèi)，每隔1掙浦紙，記錄大鼠排稀類點(diǎn)數(shù)，觀容4h，脂瀉指數(shù)=稀便率(每只動(dòng)物所排稀便數(shù)與總便數(shù)之比)x稀便級(jí)(以稀便污染濾紙形成污跡面積的大小定級(jí)，分為4級(jí):1級(jí)為污直徑小于1cm，2級(jí)污染直徑1-1.9cm，3級(jí)污染直徑2-3cm，4級(jí)污染直徑大干3cm)。統(tǒng)計(jì)時(shí)先逐個(gè)統(tǒng)計(jì)每一堆稀便的級(jí)數(shù)，然后將該鼠所有希便級(jí)數(shù)相加除以稀便次數(shù)，得到稀便的平均級(jí)數(shù)一-稀便級(jí)，級(jí)數(shù)直徑的測(cè)量:糞便形狀為圓形，則直接量直徑:若糞便形狀為橢圓形則測(cè)量最長(zhǎng)和近似圓的直徑，相加除以2。 3、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 第7天、第14天、第28天進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。 4、取材及檢測(cè) 第15、29天分批取材。腹主動(dòng)脈取血，離心取血清，采用試刻盒進(jìn)行血清乳酸、淀粉酶活性、尿D-木糖測(cè)定。 5、統(tǒng)計(jì)及分析 數(shù)據(jù)采用SPSS17 0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)外理，各項(xiàng)指標(biāo)中，計(jì)量變量采用均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差描述，正態(tài)分布的資料采用單因表方差分析，兩兩比較進(jìn)行賣角乙一安-t檢驗(yàn)，偏杰分布的資料采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取a=005，P<005為有顯著性差異，P<0.01為有極顯著性差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， |
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