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Mr_K°新蟲 (初入文壇)
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[求助]
WB實(shí)驗(yàn)蛋白印跡形態(tài)非常不規(guī)則
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大家好。本人快開(kāi)題了,最近在做WB檢測(cè)內(nèi)源性蛋白的時(shí)候,使用15%蛋白膠,半干轉(zhuǎn)PVDF膜,5%脫脂乳封閉1小時(shí),一抗孵育1小時(shí),2抗孵育1小時(shí),之間均使用TBST洗3次,每次10分鐘。顯影的時(shí)候,條帶非常奇怪。請(qǐng)問(wèn)大家是否遇到過(guò)這個(gè)現(xiàn)象,希望多給我建議和意見(jiàn)。謝謝。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (正式寫手)
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這個(gè)就是蛋白量大了,往下跑的時(shí)候,左右擴(kuò)散導(dǎo)致了蛋白牽手現(xiàn)象,可以降低蛋白上樣量,用15的分離膠那是小分子量,電壓可以低一點(diǎn)往下跑,凝膠凝固時(shí)間延長(zhǎng)一些 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |

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