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Bafilomycin A1(巴佛洛霉素A1)抑制實(shí)驗(yàn)分享
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Bafilomycin A1體外實(shí)驗(yàn)分享 在低濃度（1nm）時(shí)，能有效且特異地抑制和殺死pediatric B-cell急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞。針對(duì)自噬途徑的早期和晚期、線粒體為靶點(diǎn)，并誘導(dǎo)caspase非依賴性凋亡。Bafilomycin A1誘導(dǎo)Beclin 1與Bcl-2結(jié)合，進(jìn)一步抑制自噬并促進(jìn)凋亡細(xì)胞死亡[1] Bafilomycin A1細(xì)胞實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)分享 使用0.05%胰蛋白酶收集細(xì)胞并懸浮在含有10%FCS的培養(yǎng)基中，并將200μL懸浮液添加到96孔板的每個(gè)孔中。細(xì)胞培養(yǎng)20小時(shí)以粘附。將Bafilomycin A1(巴佛洛霉素 A1) 添加到孔中，終濃度為 200、400 和 800 nM，一式三份。 在 24、48 和 72 小時(shí)，將 20 μl WST-1 添加到細(xì)胞中。 然后在 37°C 下孵育 4 小時(shí)，使用 675 nm 參比使用分光光度計(jì)讀取板，以確定 435 nm 處的光密度 (OD)。[2] [1]Autophagy. 2015;11(8):1437-1438. [2]Exp Ther Med. 2015 Nov;10(5):1829-1834. |
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