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ouyang1999新蟲 (初入文壇)
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[交流]
跪求好氧甲烷氧化菌篩選分離方法 已有1人參與
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| 最近在做甲烷氧化菌篩選分離，采用NMS培養(yǎng)基富集，在富集液中擴(kuò)增出了甲烷代謝的基因pmoA，但把富集菌液稀釋涂布到平板（除了加瓊脂，其他組分與液體培養(yǎng)基一樣）上，放在真空干燥器里，充入甲烷倒置培養(yǎng)，第二天就長(zhǎng)出來(lái)很多菌，挑單菌落做不充甲烷，放空氣里的對(duì)照，發(fā)現(xiàn)它們也長(zhǎng)出來(lái)了，但NMS培養(yǎng)基里沒(méi)有碳源，不知道它們是靠什么碳源長(zhǎng)出來(lái)的，之后又挑這些菌劃線在LB板上，有些在LB板上長(zhǎng)，有些卻沒(méi)有長(zhǎng)出來(lái)，16S測(cè)序發(fā)現(xiàn)這些菌是甲基型，但不能利用甲烷，感覺(jué)這個(gè)NMS培養(yǎng)基的選擇性好差啊，我看文獻(xiàn)里，好像都是7-14天才長(zhǎng)出單菌落，是我等待時(shí)間太短嗎？我之前不知道這個(gè)培養(yǎng)基的選擇性這么差，調(diào)的都是3-4天長(zhǎng)出來(lái)的單菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌篩選的友友們一起探討！ |
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2樓2025-05-19 21:31:45
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