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宇宙一粒新蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC中藥提取分離含測的問題,求幫忙
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| 求助大家,我用甲醇提取一個中藥,需要測定其中的兩個單體成分的含量(倆成分都不是該中藥的主成分),然后我將粗提物進(jìn)液相,用的C18 柱,流動相是甲醇:0.1%甲酸水,梯度洗脫,甲醇比例從50%逐漸增大,第一個標(biāo)準(zhǔn)品在62%左右出來,第二個在68%左右,在樣品里這倆也是在這兩個時間段附近出來,但是中藥出來的成分太多了,他們倆與前后其他成分的分離度不行,請問這種情況怎么辦呀,是該將單位時間內(nèi)流動相的梯度變大還是變小呀,還是有其他什么方法呢(是要過柱子嗎),求賜教~ |
新蟲 (初入文壇)
至尊木蟲 (著名寫手)
美女搞科研
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這個問題很容易解決吧,你既然用標(biāo)準(zhǔn)品試出的大致的分離條件,剩下的就是優(yōu)化了,有三點因素,第一,增加整個分析的時間。第二,接近標(biāo)準(zhǔn)品出峰的比例的時候放緩梯度,甚至是等度。第三,降低進(jìn)樣量,也有利于分離度的增加。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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