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反對派銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
請教CRISPRO 敲除基因,結果反而升高。
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最近用一個可以表達兩個gRNA的載體,構建了一個敲除一段基因的質(zhì)粒,轉染后后用抗生素篩選了20個克隆,用RT-qPCR鑒定敲除效果,結果發(fā)現(xiàn)這些克隆不但沒有敲掉,反而表達量顯著升高。計算沒有敲掉也不至于升高,請問問題出在哪里? 備注:抽提RNA后,我用DNas I去除了DNA污染. qPCR的引物也沒有問題。 |
新蟲 (正式寫手)
銀蟲 (正式寫手)
新蟲 (著名寫手)
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