| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 924 | 回復(fù): 0 | |||
不言謝新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[交流]
細(xì)胞破碎方法
|
|
No.1 高速組織搗碎 將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。 No.2 玻璃勻漿器勻漿 先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來(lái)回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。 No.3 超聲波處理法 用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鐘,此法的缺點(diǎn)是在處理過(guò)程會(huì)產(chǎn)生大量的熱,應(yīng)采取相應(yīng)降溫措施。對(duì)超聲波敏感和核酸應(yīng)慎用。 No.4 反復(fù)凍融法 將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。 No.5 化學(xué)處理法 有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞,細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。 總之,無(wú)論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞或組織,最終目的都是使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酥活力,但不是全部,還可通過(guò)選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600 材料與化工 298 +8 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +5 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
[考研] 0703化學(xué) 學(xué)碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調(diào)劑 +5 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
[考研] 理學(xué),工學(xué),農(nóng)學(xué)調(diào)劑,少走彎路,這里歡迎您! +8 | likeihood 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +6 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 人間唯你是清歡 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
[考研] 江蘇省農(nóng)科院招調(diào)劑1名 +5 | Qwertyuop 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
[碩博家園] 2025屆雙非化工碩士畢業(yè),申博 +4 | 更多的是 2026-02-27 | 5/250 |
|
|
[基金申請(qǐng)] 沒(méi)有青基直接申請(qǐng)面上,感覺(jué)自己瘋了 +5 | kevin63t 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
[考研] 成績(jī)276,專業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +7 | 小陳朵 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
[考研]
材料270求調(diào)劑
6+6
|
Eiiiio 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
[考研]
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +10 | 劉夢(mèng)微 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +4 | 2103240126 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | repeatt?t 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
[考研] 085600求調(diào)劑 +4 | LRZZZZZZ 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)材料專碩328,求調(diào)劑 +3 | shs1083 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
[基金申請(qǐng)] 此成果不能導(dǎo)入原因:元數(shù)據(jù)必填信息不完整,可 進(jìn)行補(bǔ)充。 +4 | Kittylucky 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | cgyzqwn 2026-03-01 | 7/350 |
|