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draxlx新蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
易錯(cuò)PCR構(gòu)建突變體庫(kù)篩選優(yōu)質(zhì)突變體 已有1人參與
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有沒(méi)有做易錯(cuò)PCR的朋友交流一下啊。我導(dǎo)給我的課題就是用一個(gè)基因去做易錯(cuò)，但是按照我目前的情況來(lái)看，突變體庫(kù)根本就不夠大，平均做一次連接轉(zhuǎn)化的轉(zhuǎn)化子只有20個(gè)出頭，做到現(xiàn)在還沒(méi)有篩出一個(gè)很好的正向突變體，大部分轉(zhuǎn)化子都是直接喪失酶活了（我的目的蛋白的一種酶）。再這么下去，畢業(yè)都成問(wèn)題了 。看了一些以易錯(cuò)為課題的碩博論文，好幾千的突變體庫(kù)才篩出來(lái)2-3個(gè)正向突變體。是感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率低的問(wèn)題嗎？ |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率太低了，我們要求一個(gè)平板上要長(zhǎng)200個(gè)菌落，我們課題組的突變體庫(kù)基本上10000往上。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2023-05-29 10:06:41
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