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吉田bio銅蟲(chóng) (小有名氣)
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糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型
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糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型 【造模機(jī)制】采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)加小劑量鏈脲佐菌素(STZ)可造成大鼠2型糖尿病高血糖能夠刺激蛋白激酶C的活化,使內(nèi)皮細(xì)胞屏障功能受損,通過(guò)多條途徑使自由產(chǎn)生增多對(duì)血管和內(nèi)皮產(chǎn)生毒性作用形成動(dòng)脈粥樣硬化病變。 【造模方法】選用1個(gè)月齡體重140~160g,SD大鼠，高脂高糖飼料由基礎(chǔ)飼料加人脂肪15%、蔗糖20%、雞蛋5%、膽固1%、食鹽0.5%配制而成。STZ和枸櫞酸臨用時(shí)配成0.Immol/L,pH4.2的枸櫞酸枸櫞酸鈉緩沖液,于 4℃下保存。造模方法:大鼠每籠只均適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后稱重,隨機(jī)取8只作為空白對(duì)照組,飼以基礎(chǔ)飼料,其余為糖尿病(DM)實(shí)驗(yàn)組,喂高脂高糖飼料,均自由進(jìn)食、飲水共4周，誘導(dǎo)胰島素抵抗。再將各組大隔夜空腹12小時(shí)后，右側(cè)腹腔注射其中實(shí)驗(yàn)組大鼠注射2%TZ30mg/kg(未成模者在注射后11)并此間繼續(xù)喂以高糖高脂飼料�？瞻捉M注射相同劑量的枸櫞酸鈉緩沖液并喂以普通飼料。DM 判定標(biāo)準(zhǔn)為:注射后第3714日測(cè)定血糖,如隨機(jī)血糖超過(guò)16.9mmol/L;或出現(xiàn)多飲、多尿、消瘦、乏力、懶動(dòng)等DM癥狀且2次隨機(jī)血糖高于11.1mmol/L即為造模成功。 取材和檢測(cè):第6周末，大鼠禁食10小時(shí)，1%巴比妥鈉45mg/kg麻醉下由眼眶靜脈叢采血測(cè)血糖、血脂。第11周末處死動(dòng)物并取主動(dòng)脈弓部一部分于甲醛溶液中固定，另一部分置于2.5%戊二醛液中保存。血糖采用強(qiáng)生穩(wěn)步血糖儀測(cè)定;血脂采用直接一步法或氧化酶法測(cè)TC、TGHDLL、LDL-L。光鏡、電鏡標(biāo)本制備及光鏡病理組織學(xué)和掃描電鏡血管內(nèi)膜面超微結(jié)構(gòu)觀察并拍照 【模型特點(diǎn)】先飼以高脂高糖飼料4周，促發(fā)胰島素抵抗，繼以小劑量STZ(30mg/kg)腹腔注射，可以成功誘導(dǎo)建立糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型。注射STZ2周后大鼠血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及HDL-L/總膽固醇均顯著高于空白組;形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，模型組動(dòng)脈出現(xiàn)典型動(dòng)脈粥樣硬化(AS)病變。 【應(yīng)用范圍】本模型適用于糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化癥的發(fā)病機(jī)制和防治研究。特別是應(yīng)用于糖尿病時(shí)大血管病變的研究。 【注意事項(xiàng)】 1.注意改善造模動(dòng)物的飲食需要 高糖高脂飲食會(huì)在進(jìn)食2周后因油膩影響胃口，體重增加減慢，可以在進(jìn)食量少的白天給予5g/只的普通飼料，同時(shí)盡量保持飼料干燥和香味,也可用果糖代替食物中的白糖進(jìn)食量會(huì)增加。 2.STZ應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用 最好分批次配用，同時(shí)用冰袋裝好保存以保持其有效性。因大鼠個(gè)體差異,第1次注射STZ后血糖未升高者可再注射，成模率會(huì)增高。 【模型評(píng)估】本模型通過(guò)較長(zhǎng)期的“糖毒性”“脂毒性”所建的糖尿病伴動(dòng)脈粥樣硬化病變大鼠模型與人類2型糖尿病代謝特征相似，DM與AS發(fā)病特點(diǎn)也相似，省時(shí)、成功率高(95%)。是目前研究DM的AS較理想的動(dòng)物模型，也是研究人類糖尿病大血管病變較理想的動(dòng)物模型。 |
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