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moyunzhi銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
SDS-PAGE電泳法,marker缺最大的兩條帶可能的原因? 已有1人參與
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最近遇到很神奇的一個(gè)問(wèn)題: 我在跑SDS-PAGE電泳時(shí),marker一共8條帶,但時(shí)跑出來(lái)時(shí)只有6條帶,最大的兩條帶沒(méi)有。 于是我購(gòu)買(mǎi)了 制膠的kit,用kit制膠跑出來(lái)的也是6條帶。 然后我就把同一管marker送到別的實(shí)驗(yàn)室?guī)兔σ才芰艘幌,奇跡似乎出現(xiàn)了,別的實(shí)驗(yàn)室就能把 marker的完整條帶都跑出來(lái)。 現(xiàn)在是在時(shí)懵的不行。難道時(shí)我人出了問(wèn)題? 求各位有經(jīng)驗(yàn)的大佬指點(diǎn)一下。感激!感激!感激! (小木蟲(chóng)上傳圖片怎么回事?上傳不了?一上傳就卡死了。給不了圖片啊,傷心,傷心。) |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (初入文壇)
銅蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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根據(jù)你的描述,如果你不是后來(lái)把內(nèi)外槽的buffer液面補(bǔ)充到相同高度,我做一個(gè)猜想,濃縮膠漏液,而分離膠不漏液,這個(gè)說(shuō)明,漏液?jiǎn)栴}應(yīng)該不是膠板裝夾問(wèn)題導(dǎo)致的,應(yīng)該是從膠板內(nèi)漏出去的,可能是濃縮膠一開(kāi)始和玻板之間有縫隙,在之后,凝膠不斷吸水膨脹,使得凝膠與板子貼合更緊密,因此,后面就不漏液了,從這個(gè)猜想去分析大分子蛋白消失的問(wèn)題,可能是大蛋白在后面因?yàn)槟z和膠板的縫隙跑丟了。 解決方法:為了解決玻璃板和凝膠的縫隙問(wèn)題,需要注意幾點(diǎn),1、凝膠配置好需要立即使用,防止凝膠干縮;2、玻璃板需要清洗干凈,不能有任何污漬;3、凝膠的速凝劑比例要選擇合適 |
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