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吉田bio銅蟲(chóng) (小有名氣)
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鏈脲佐糖尿病動(dòng)物模型
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鏈脲佐糖尿病動(dòng)物模型 【造模機(jī)制】鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ）是目前使用最廣泛的糖尿病動(dòng)物模型化學(xué)誘導(dǎo)劑，它對(duì)一些種屬的動(dòng)物胰島β細(xì)胞有選擇的破壞，可以使猴、狗、羊、兔、大鼠、小鼠等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生糖尿病。一次大劑量或多次小劑量腹腔或靜脈注射STZ均可制備1型糖尿病模型。一次大劑量注射所制得的速發(fā)型糖尿病系胰島 β細(xì)胞直接受損所致，多次小劑量注射所制得的遲發(fā)型糖尿病模型β細(xì)胞損傷可能與T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫機(jī)制有關(guān)。黃波等探討了不同途徑注射STZ致大鼠糖尿病模型的研究，認(rèn)為尾靜脈給藥是注射STZ致大鼠糖尿病的最佳途徑。STZ和四氧嘧啶單獨(dú)使用時(shí)，毒性較大，造模成功率低。鄭里翔等采用聯(lián)合使用小劑量STZ(30mg/kg)加四氧嘧啶(50mg/kg)方法，一次靜脈注射，降低了毒性，增加了造模成功率，且降低了成本。STZ誘導(dǎo)制備1型糖尿病模型時(shí)，多次小劑量注射可有效模擬糖尿病的病程及發(fā)病原理，并降低動(dòng)物死亡率，故目前使用增多。 【造模方法】STZ能誘發(fā)大鼠、小鼠、狗、猴、小羊、中國(guó)地鼠、豚鼠和免等許多動(dòng)物產(chǎn)生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠制造動(dòng)物模型。國(guó)內(nèi)外許多作者選擇純系的Wistar大鼠或SD大鼠。Mordes 等報(bào)道選用雄性大鼠制備模型的成模率明顯高于雌性大鼠。Masiello等研究表明，大鼠對(duì)于STZ的敏感性具有年齡依賴性，成鼠或大體重鼠較幼鼠或小體重鼠更易成模型。國(guó)內(nèi)學(xué)者多采用200～250g的大鼠制備模型。采取標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料喂養(yǎng)，不限制飲水，鐵籠飼養(yǎng)、自然晝夜光線照明，室內(nèi)通風(fēng)良好，相對(duì)濕度40%~70%，室溫18~28℃，室內(nèi)氨濃度應(yīng)小于20ppm。 STZ臨用前需用0.1mol/L pH4.4的枸櫞酸緩沖液(即0.1mol/L無(wú)菌枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液）配成2%的STZ溶液，新鮮使用，劑量因?qū)嶒?yàn)動(dòng)物的種系、品種不同而異。大鼠糖尿病STZ的劑量為40～~75mg/kg。STZ 誘發(fā)動(dòng)物糖尿病模型的給藥途徑很多，包括靜脈注射、腹腔注射以及皮下注射等。由于STZ的穩(wěn)定性較差，配制后需立即使用方能產(chǎn)生良好效果。因此從簡(jiǎn)便、有效考慮，選擇腹腔內(nèi)注射會(huì)取得較好效果。于德民等通過(guò)空腹一次性腹腔注射和非空腹一次性腹腔注射STZ以及累加注射的方法建立了速發(fā)型大鼠糖尿病模型，發(fā)現(xiàn)空腹一次性注射的成模率為最高，達(dá)100%。同時(shí)利用STZ與弗氏完全佐劑(CFA）合用每周注射（靜脈內(nèi)）一次，連續(xù)三周而建立遲發(fā)型大鼠糖尿病模型，大鼠可產(chǎn)生持續(xù)性高血糖及糖尿病癥狀。 【模型特點(diǎn)】成模后應(yīng)每周測(cè)定一次定性尿糖和體重，兩次24小時(shí)尿量和飲水量，每月測(cè)定二次血糖。速發(fā)型成模者應(yīng)在腹腔內(nèi)注射2小時(shí)、7小時(shí)及24小時(shí)測(cè)定非空腹血糖值。有人研究指出注射STZ后，血糖的變化呈三個(gè)時(shí)相，即在1~2小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)的初期高血糖相，在6~12小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)低血糖相，大約從24小時(shí)起開(kāi)始出現(xiàn)持久的高血糖相即糖尿病血糖相。Junod等給大鼠（體重165~230g、雄性）靜脈注射65mg/kg的STZ，2小時(shí)出現(xiàn)血糖升高，10小時(shí)出現(xiàn)明顯的低血糖，24小時(shí)至28小時(shí)呈現(xiàn)持久的高血糖相。另有人給 Al-bino 小鼠（體重20~30g)靜脈注射175mg/kgSTZ,1~3小時(shí)血糖值升高，7小時(shí)血糖值最低，24小時(shí)血糖升高更為顯著。近年來(lái)通過(guò)國(guó)內(nèi)外學(xué)者的深入研究，已基本傾向于將血糖值大于16.65mmol/L作為糖尿病大鼠空腹或非空腹的成模標(biāo)準(zhǔn)。注射STZ后，胰腺的胰島呈現(xiàn)明顯的病理形態(tài)學(xué)變化。B細(xì)胞顯示不同程度的脫顆粒、變性、壞死及再生變化�！緫�(yīng)用范圍】該模型適用于糖尿病發(fā)病機(jī)制、病理生理變化及有效藥物治療研究。常用于治療糖尿病有效中藥的藥物篩選和藥效學(xué)研究。 【注意事項(xiàng)】 1.鏈尿佐菌素一定要在4℃下保存 緩沖液必須臨時(shí)配制，并使其保持4℃，這樣可減少動(dòng)物的死亡率。 2.大鼠注射STZ30天后血糖有下降的趨勢(shì)少數(shù)動(dòng)物的高血糖有所緩解，這是由于動(dòng)物的胰腺腺泡細(xì)胞增殖并轉(zhuǎn)化為β細(xì)胞所致。 3.動(dòng)物造模前需要禁食6～8小時(shí)。 4.中國(guó)地鼠、BB大鼠、NOD小鼠有自身免疫等病因參與 胰島 β細(xì)胞受損，因而胰島素缺乏，是胰島素缺乏型自發(fā)性糖尿病動(dòng)物，且不肥胖，常用于1型糖尿病病因、病理生理等研究。 【模型評(píng)估】STZ對(duì)β細(xì)胞破壞選擇程度高，毒性較四氧嘧啶小，可一次大劑量或多次小劑量注射。小劑量多次注射或與四氧嘧啶聯(lián)合應(yīng)用可降低動(dòng)物死亡率，提高造模率，故STZ造模目前是國(guó)內(nèi)外應(yīng)用最多的一種方法。 |
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