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2280ke銅蟲 (小有名氣)
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解讀行為學(xué)：強(qiáng)迫動(dòng)物游泳
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強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是Porsolt 等人于 1977 年和 1978 年建立的方法。其原理主要是讓動(dòng)物被迫在一個(gè)局限且無(wú)法逃脫的空間游泳，由于嚙齒類動(dòng)物先天對(duì)水的厭惡，它們?cè)谒袝?huì)拼命掙扎游動(dòng)，并試圖逃離水環(huán)境，一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)逃離無(wú)望時(shí)動(dòng)物停止掙扎表現(xiàn)出“行為絕望”狀態(tài)( 漂浮不動(dòng)狀態(tài)) 。 大、小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)以游泳的不動(dòng)時(shí)間為主要指標(biāo)檢測(cè)動(dòng)物的絕望行為，是抗抑郁藥物初篩以及檢測(cè)模型動(dòng)物是否出現(xiàn)“抑郁樣”行為的常用檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。主要用于篩選具有抗抑郁活性的藥物以及研究抑郁癥相關(guān)受體。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)亦有其局限性，此法并非適用于所有種屬， 目前常用的模型動(dòng)物是昆明小鼠和 Wistar大鼠。 昆明小鼠的個(gè)體差異更為明顯，但因小鼠只需要進(jìn)行一次實(shí)驗(yàn)，耗藥量和實(shí)驗(yàn)成本明顯低于大鼠，并可通過(guò)增加實(shí)驗(yàn)個(gè)體數(shù)目彌補(bǔ)個(gè)體差異較大所引起的實(shí)驗(yàn)偏差，因而成為強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的首選對(duì)象。 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)一般需要 10 只以上小鼠或 6-8只大鼠。實(shí)驗(yàn)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)節(jié)水深， 避免動(dòng)物后爪支撐身體而影響藥效預(yù)判。實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)時(shí)也應(yīng)考慮生物鐘的影響，盡量避免在 3 月、10 月、11 月等難以顯示出行為結(jié)果的時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)期間保持安靜，光線無(wú)明顯變化，室溫保持在 20~25℃。該實(shí)驗(yàn)在裝有 10cm水（23 + 2℃）的透明有機(jī)玻璃圓筒中進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將小鼠放入水中，持續(xù)時(shí)間為 6min，視頻記錄整個(gè)過(guò)程。在測(cè)試結(jié)束時(shí)，將動(dòng)物從水中移出并放回籠中，雙盲記錄每只小鼠后4min的累積不動(dòng)時(shí)間。 注意事項(xiàng) 實(shí)驗(yàn)前調(diào)節(jié)測(cè)試箱內(nèi)水溫，水溫應(yīng)為 23 ～ 25℃。水深應(yīng)根據(jù)動(dòng)物體重進(jìn)行調(diào)整，動(dòng)物尾巴與測(cè)試箱底面保持一定距離。 如同時(shí)進(jìn)行多只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，每?jī)芍粍?dòng)物間應(yīng)用不透明擋板隔開。 大鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前 1 d 預(yù)游，24 h 后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)。記錄 5 min 內(nèi)動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間、游泳時(shí)間及攀爬時(shí)間。 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在檢測(cè)當(dāng)天進(jìn)行，小鼠游泳時(shí)間應(yīng)為 6 min，記錄后 4 min 的游泳時(shí)間、不動(dòng)時(shí)間及攀爬時(shí)間。 評(píng)價(jià)指標(biāo) 評(píng)價(jià)指標(biāo)應(yīng)采用動(dòng)物不動(dòng)、攀爬、游泳三類動(dòng)作的時(shí)間及次數(shù)進(jìn)行判定。 不動(dòng)( immobility) : 動(dòng)物在水中停止掙扎，呈漂浮狀態(tài)，僅有輕微的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在 水面。不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)表明抑郁程度越重。正常小鼠不動(dòng)時(shí)間在檢測(cè)時(shí)間的 40% ～ 80%內(nèi); 正常大鼠不動(dòng)時(shí)間在檢測(cè)時(shí)間的 30% ～ 70%內(nèi); 抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn)：不動(dòng)時(shí)間與對(duì)照組相比顯著性增加( P ＜ 0. 05) 。 游泳( swimming) : 動(dòng)物進(jìn)行流暢、協(xié)調(diào)的運(yùn)動(dòng)，動(dòng)物四肢始終在水面以下。游泳時(shí)間和游泳距 離越少，表明抑郁程度越重。 攀爬( climbing) : 動(dòng)物四肢強(qiáng)有力伸出水面，并沿測(cè)試箱壁做劇烈的上下動(dòng)作。5 min 檢測(cè)期內(nèi)，SD 大鼠攀爬時(shí)間 60 ～ 130 s。攀爬時(shí)間越少，表明動(dòng)物抑郁程度越重。 結(jié)語(yǔ) 大、小鼠與人類同源基因高達(dá) 85%，是最常使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，廣泛用于抑郁癥發(fā)生機(jī)制及藥物防護(hù)的研究，其結(jié)果可以類推到人，避免了直接以人為對(duì)象進(jìn)行研究的風(fēng)險(xiǎn)和倫理問(wèn)題。如何選擇規(guī)范的行為學(xué)檢測(cè)方法及合適的動(dòng)物模型，對(duì)于抑郁癥的發(fā)生發(fā)展機(jī)制研究，以及新藥、保健食品功效評(píng)價(jià)具有十分重要的作用。構(gòu)建更精準(zhǔn)、系統(tǒng)的行為學(xué)評(píng)價(jià)方法，準(zhǔn)確解讀、全面詮釋模型動(dòng)物的行為學(xué)表型內(nèi)涵，并與臨床癥狀相匹配，提高動(dòng)物模型的表觀、預(yù)測(cè)、結(jié)構(gòu)效度，是動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)方法的發(fā)展方向。 |
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