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吉田bio銅蟲(chóng) (小有名氣)
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變態(tài)反應(yīng)性肝損傷動(dòng)物模型
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變態(tài)反應(yīng)性肝損傷動(dòng)物模型 變態(tài)反應(yīng)性肝損傷是許多肝病中引起肝細(xì)胞損壞的主要原因之一，而肝細(xì)胞的破壞又是許多肝炎發(fā)病的關(guān)鍵步驟。變態(tài)反應(yīng)性肝損傷動(dòng)物模型(animal model of liver injury in duced by allergy）對(duì)于研究變態(tài)反應(yīng)性肝損傷以及肝細(xì)胞損壞的機(jī)制及肝病的治療具有至關(guān)重要的作用。 【造模機(jī)制】遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH）是由T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，其最終階段是以巨噬細(xì)胞為中心的炎癥反應(yīng)。本模型將 2，4，6-三硝基氯苯(picryl chloride,PCI)所致的遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)導(dǎo)人肝臟誘發(fā)肝損傷。 【造模方法】選用6～7周齡的昆明種雌性小鼠，體重18～22g。儀器藥品：1%(W/V)PCI的乙醇溶液、1%PCI的橄欖油溶液。模型制作：選用6~7周齡的昆明種雌性小鼠，體重18~22g。刮去小鼠腹毛，涂1%PCI的乙醇溶液100pμ1致敏，6天后在小鼠右耳兩面涂1%PCI的橄欖油溶液30pμ1攻擊，誘發(fā)第1次DTH反應(yīng)，再6天后右耳攻擊，誘發(fā)第2次DTH反應(yīng)。用PCI致敏，6天后攻擊時(shí)用各種濃度的PCI橄欖油溶液10μ1肝穿刺誘發(fā)DTH反應(yīng)，或在致敏5天前在腹部預(yù)致敏1次，或在致敏的6天及3天前預(yù)致敏2次，或按上述方法在耳誘發(fā)第1次DTH，然后再次致敏，再6天后在肝臟誘發(fā)肝損傷。 模型檢測(cè)：在PCI肝穿刺后0小時(shí)，6小時(shí)，12小時(shí)，18小時(shí)，24小時(shí)分別取血清測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(SGPT）水平。將部分動(dòng)物處死后取肝組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。 【模型特點(diǎn)】第一次DTH反應(yīng)耳殼出現(xiàn)了明顯腫脹；第二次DTH反應(yīng)時(shí)其腫脹較第一次更為強(qiáng)烈。在PCI肝穿刺后12小時(shí)，SGPT水平有所升高，18小時(shí)達(dá)到高峰，24小時(shí)后開(kāi)始下降，此后恢復(fù)正常水平。組織病理學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞明顯壞死，并出現(xiàn)粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)及脂肪變性。 【注意事項(xiàng)】本模型模擬T細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)誘導(dǎo)的肝損傷，其主要效應(yīng)細(xì)胞為CD4+T和CD8+T細(xì)胞，最終階段是以巨噬細(xì)胞為中心的炎癥反應(yīng)。肝損傷小鼠肝內(nèi)浸潤(rùn)的T淋巴細(xì)胞具有減弱肝細(xì)胞釋放谷丙轉(zhuǎn)氨酶的能力，故選擇模型時(shí)應(yīng)注意以上特點(diǎn)，以復(fù)制出理想合適的動(dòng)物模型。 【應(yīng)用范圍】該模型適用于肝損傷機(jī)制及肝免疫調(diào)節(jié)劑的藥理學(xué)研究。亦可用于藥物治療變態(tài)反應(yīng)性肝損傷效果的研究。 |
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