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實驗小幫手新蟲 (初入文壇)
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[交流]
病理切片不易，絕世刀法需要慢慢練，但該避的坑你不能不懂！
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病理實驗看似簡單，實際上稍不注意細節(jié)就漏洞百出，不同組織如何保存？不同切片有何區(qū)別？絕世刀法需要慢慢練，但該避的坑你不能不懂！今天小助手匯總了粉絲私信過我們的那些關(guān)于病理切片的問題，關(guān)注小助手，看小助手如何搞定這些實驗難題。 小助手，組織如何保存？ 普通病理用固定液（多聚甲醛）保存；免疫組化、免疫熒光實驗不宜固定時間太久。 小助手，不同組織都用一個脫水流程嗎？ 不同組織，其結(jié)構(gòu)不同，脫水流程也有是區(qū)別的 小助手，石蠟包埋切片一般切的厚度是多少？冰凍切片切多厚？ 石蠟切片厚度為3-10um；冰切厚度為4-5um。 小助手，冰切出現(xiàn)裂痕的原因？ 可能是防卷板沒放好，冷凍切片機的溫度一般是零下10到15℃；還有可能是你的組織比較硬或者是刀片的問題，不同組織切片機里也要不同溫度需要注意一下。 石蠟切片老是卷片是為什么？ 蠟塊不夠冰或者冰過頭了；切片刀不鋒利 為什么切片總是脫片？ 1）粘附劑因素在制作組織學和病理學石蠟切片時，一般用甘油蛋白做粘附劑，但若甘油蛋白配制的時間過長，蛋白質(zhì)變性，甘油蛋白的粘附作用即降低，可導致組織切片與載玻片粘附不牢，切片一進入二甲苯溶液即從玻片上脫落下來。 2）溫度的影響常規(guī)石蠟切片染色，溫度一般在20-37較好。組織從二甲苯脫蠟出來，立即進入室溫的純酒精清洗，這樣組織一下從37降至4℃左右，一冷一熱，熱脹冷縮，造成組織容易從載玻片上脫落下來。 3）浸蠟時間的影響，組織取材后在脫水，浸蠟時間和包埋溫度上掌握不夠準確，特別是腺體組織比較嬌嫩，稍有過頭組織就變脆，在染色過程中就極易出現(xiàn)脫片現(xiàn)象。 腦組織切片有空洞產(chǎn)生是什么原因？ 1）組織原因 2）固定不充分 3）病變 4）攤片溫度過高 石蠟切片總是彎帶是為什么？ 1）蠟塊上下兩邊或左右兩邊不平行 2）蠟塊與切片刀刀口不平行 3）切片刀鋒利程度不一致4）組織不平整 硬組織切片怎么切，需要注意什么？ 1）包埋時要抽真空，常溫靜置 2）硬塑包埋，用金剛石刀片切片，注意厚度（20um），注意切片的平整度 石蠟切片總是切的厚怎么辦？ 1）切片機微調(diào)失靈，齒輪跳格 2）切片機上的組織夾持器未擰緊，刀片角度太大或太小 3）蠟塊太大、太硬 |
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