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2280ke銅蟲(chóng) (小有名氣)
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心梗、心肌缺血再灌注相關(guān)藥效實(shí)驗(yàn)整體解決方案
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心梗、心肌缺血再灌注相關(guān)藥效實(shí)驗(yàn)整體解決方案 一、模型種類(lèi)： 1、大、小鼠、急性心肌缺血模型； 2、大、小鼠、心肌缺血再灌注 二、心梗（MI）模型制備方法： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物： SD大鼠 ，雄性， 體重：180-200g 周齡：6-7周 動(dòng)物等級(jí)：SPF級(jí) 2、手術(shù)方法： 動(dòng)物深度麻醉，確認(rèn)麻醉狀態(tài)后，備皮，安裝好心電監(jiān)護(hù)儀，消毒局部皮膚，鋪洞巾后剪開(kāi)肋間皮膚，鈍性分離肌肉、打開(kāi)心包膜，將心臟推出體外，暴露左冠狀動(dòng)脈前降支，用6-0無(wú)菌絲線(xiàn)快速結(jié)扎，打活結(jié)，看到心臟底部變白，用荷包縫法迅速關(guān)閉胸腔，擠壓防止氣胸，造成左室前壁心肌缺血。分別記錄術(shù)前、缺血時(shí)心電圖變化。 三、心肌缺血再灌注（I/R）模型制備方法： 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠 ，雄性，體重：180-200g，周齡：6-7周，動(dòng)物等級(jí)：SPF級(jí) 2、手術(shù)方法： 動(dòng)物深度麻醉，確認(rèn)麻醉狀態(tài)后，備皮，安裝好心電監(jiān)護(hù)儀，消毒局部皮膚，鋪洞巾后剪開(kāi)肋間皮膚，鈍性分離肌肉、打開(kāi)心包膜，將心臟推出體外，暴露左冠狀動(dòng)脈前降支，用6-0無(wú)菌絲線(xiàn)快速結(jié)扎，打活結(jié)，看到心臟底部變白，用荷包縫法迅速關(guān)閉胸腔，擠壓防止氣胸，造成左室前壁心肌缺血。分別記錄術(shù)前、缺血時(shí)心電圖變化。 到達(dá)缺血時(shí)間以后，打開(kāi)胸腔，解開(kāi)活結(jié)，再次關(guān)閉胸腔，縫合肌肉皮膚，進(jìn)行心肺復(fù)蘇。分別記錄術(shù)前、缺血時(shí)和再灌注后的心電圖變化。造模成功后進(jìn)行藥物治療，術(shù)后觀(guān)察動(dòng)物活動(dòng)、采食情況。處死前對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采血。術(shù)后進(jìn)行心肌組織取樣、TTC-Evans blue染色，進(jìn)行心梗面積計(jì)算。 四、手術(shù)后護(hù)理及觀(guān)察： a術(shù)后護(hù)理：術(shù)后單籠飼養(yǎng)，常規(guī)飼料及飲水。 b觀(guān)察：每天觀(guān)察動(dòng)物死亡或?yàn)l死情況、精神狀態(tài)、行為活動(dòng)、進(jìn)食等。 c傷口局部觀(guān)察：術(shù)后每天1次，觀(guān)察傷口有無(wú)紅腫發(fā)炎等。 d體重稱(chēng)量記錄：術(shù)后2次/周，稱(chēng)重并記錄體重變化情況。 五、治療及評(píng)價(jià)： 1、心肌內(nèi)多點(diǎn)注射 2、灌胃、腹腔、尾靜脈等多途徑給藥 、大小鼠眼底靜脈叢、大動(dòng)物靜脈采血 3、實(shí)時(shí)心電監(jiān)護(hù)，輸出心電圖 4、動(dòng)物心臟超聲及數(shù)據(jù)分析 5、Micro-CT、小動(dòng)物核磁成像 6、心臟TTC染色 7、心臟病理切片，HE、masson，天狼猩紅染色 8、病理讀片，分析梗死面積、膠原百分比 9、免疫組化、免疫熒光、凋亡（Tunel） 10、透射電鏡、掃描電鏡分析。 11、WB、QPCR 心梗相關(guān)血清指標(biāo)檢測(cè)（CK-MB等） 特點(diǎn)： 1、制備過(guò)程技術(shù)嫻熟，最大限度的保證入組動(dòng)物梗死程度均一。 2、不存在因氣管切開(kāi)而引起的窒息死亡。 3、創(chuàng)傷小，恢復(fù)快，最大限度減少人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。 |
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