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俊俊ALEX鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
考馬斯亮藍(lán)法測蛋白含量-試劑盒的選擇 已有1人參與
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用考馬斯亮藍(lán)法測蛋白含量，為什么同一份樣品，用不同廠家的BSA試劑盒測定，結(jié)果有差別，應(yīng)該如何選擇？ |
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fuyuandj86
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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考馬斯亮藍(lán)染液這東西沒什么技術(shù)含量，就是溶解過濾稀釋而已。大概率是標(biāo)準(zhǔn)品略有差異。 其實如果你不用BSA做標(biāo)準(zhǔn)品，用其他一些蛋白（比如Igg）就會發(fā)現(xiàn)做出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線都不一樣。這是因為考馬斯亮藍(lán)實際上是結(jié)合在蛋白質(zhì)的精氨酸和芳香族的氨基酸上，不同蛋白質(zhì)氨基酸的組成不一樣，所以這個標(biāo)準(zhǔn)曲線也就是一個大概的估計，你沒法保證你的待測蛋白中的氨基酸組成比例和標(biāo)準(zhǔn)品一模一樣，沒有必要糾結(jié)于不同的標(biāo)準(zhǔn)品做出來的標(biāo)準(zhǔn)曲線略有差異。 |
2樓2022-07-14 21:26:23
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