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吉田bio銅蟲 (小有名氣)
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佐劑性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎動物模型
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佐劑性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎動物模型 【造模機(jī)制】弗氏佐劑(Freund adjuvant,FA)是用礦物油(液狀石蠟）、乳化劑(羊毛脂)和滅活的分枝桿菌（結(jié)核分枝桿菌或卡介苗）組成的油包水乳化佐劑。完全具有這三種成分的佐劑稱為弗氏完全佐劑(complete Freund adjuvant,CFA)；不含分枝桿菌的佐劑為弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant,IFA)。在動物皮下組織注射弗氏佐劑后，弗氏佐劑內(nèi)的液狀石蠟不能代謝而存留在注射部位起到抗原儲存作用，使抗原緩慢持續(xù)地釋放，不斷刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng)而產(chǎn)生免疫反應(yīng)；羊毛脂可使水溶性抗原與油穩(wěn)定地乳化；分枝桿菌具有很強的免疫刺激作用，可以非特異性地激活免疫系統(tǒng)。有報道CFA中結(jié)核桿菌蛋白分子與關(guān)節(jié)滑膜上的某些糖蛋白分子結(jié)構(gòu)相似，可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生自身抗原或結(jié)核桿菌與鼠組織的復(fù)合物，被T淋巴細(xì)胞識別，誘發(fā)針對關(guān)節(jié)的繼發(fā)性自身免疫反應(yīng)。 【造模方法】弗氏完全佐劑的配置方法是液狀石蠟和無水羊毛脂按 6：4(V/V)(夏天使用）或2：1(冬天使用）的比例混合,高壓消毒后,按 5mg/ml加入 80℃滅活1小時的減毒卡介苗或干燥結(jié)核死菌制成，4℃保存?zhèn)溆�。不加卡介苗或結(jié)核死菌的為IFA。目前弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑均已有成品市售。 選用體重 150~200g的大鼠。用乙醚將動物淺麻醉，用0.1ml弗氏完全佐劑皮內(nèi)注射于大鼠尾根部皮下或后肢足墊內(nèi)即可。1周后出現(xiàn)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病理改變。 【模型特點】接種后 3～4天注射局部腫脹并達(dá)到高峰，然后逐漸減輕,約在第 8天后再度腫脹并逐漸加重。因遲發(fā)性超敏反應(yīng)，接種后第10~18天另一側(cè)后肢足墊腫脹，第18~25天形成多發(fā)性關(guān)節(jié)炎。接種4 周光鏡下可見關(guān)節(jié)滑膜組織中有中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞漫潤，關(guān)節(jié)腔內(nèi)有纖維蛋白、多形核白細(xì)胞和單核細(xì)胞滲出，出現(xiàn)滑膜組織炎性增生，血管翳形成并伸向關(guān)節(jié)軟骨表面，關(guān)節(jié)軟骨破壞。 【應(yīng)用范圍】本模型可引起明顯的細(xì)胞免疫功能異常，與人類類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病過程類似。多用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病理過程和實驗性治療研究。 【注意事項】①制備弗氏完全佐劑時應(yīng)將分枝桿菌充分研碎，以提高模型的成功率；②年幼（<21日齡）或年長（>9個月齡）的大鼠均不易誘導(dǎo)佐劑性關(guān)節(jié)炎。 【模型評價】本模型是常用的經(jīng)典研究實驗?zāi)Ｐ�，但這一模型可受到細(xì)菌和佐劑成分比率的干擾，病變程度個體差異較大，而影響實驗的進(jìn)程和實驗結(jié)果。有報道將卡介苗濃度提高至 20mg/ml的CFA O.1ml注射至大鼠后膠足跖皮內(nèi)能明顯提高成功率,較以往報道的含10mg/ml卡介苗濃度的CFA 0.05ml 注射量、背部多點注射法等有較大的改進(jìn)。 |
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