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eric201212

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[交流] E.COLI表達(dá)的小分子蛋白不經(jīng)過(guò)腎臟代謝而是經(jīng)過(guò)肝臟代謝，到底哪里出了問(wèn)題呢？

蛋白帶有His標(biāo)簽，25kD左右，鎳柱純化，250 mM咪唑洗脫下來(lái)的，電泳和wb都做了沒(méi)什么問(wèn)題，但是在小鼠體內(nèi)代謝監(jiān)測(cè)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)大部分還是通過(guò)肝臟代謝，理論來(lái)說(shuō)應(yīng)該通過(guò)腎臟代謝（用酵母系統(tǒng)表達(dá)的同一個(gè)蛋白也確認(rèn)了是通過(guò)腎臟代謝的），難道是咪唑的原因嗎？會(huì)讓蛋白聚集？

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1樓 2022-06-18 23:20:44

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銅蟲 (正式寫手)

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eric201212(金幣+1): 謝謝參與

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7樓2022-07-31 22:17:03

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fuyuandj86

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eric201212(金幣+1): 謝謝參與

讀不懂。蛋白進(jìn)入腸胃后不是應(yīng)該被蛋白酶消化掉嗎？然后被消化后的氨基酸首先就去了肝臟。
還是說(shuō)你把蛋白直接靜脈注射到血液了？腎臟又不是血漿蛋白分解的主要場(chǎng)所，為啥會(huì)在腎臟代謝？血漿里的一部分蛋白就是在肝臟里被分解的，這也沒(méi)問(wèn)題呀？
你是想說(shuō)腎臟的蛋白過(guò)濾功能或蛋白重吸收功能出問(wèn)題了嗎？

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3樓2022-06-19 19:17:28

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eric201212

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引用回帖:

3樓: Originally posted by fuyuandj86 at 2022-06-19 19:17:28
讀不懂。蛋白進(jìn)入腸胃后不是應(yīng)該被蛋白酶消化掉嗎？然后被消化后的氨基酸首先就去了肝臟。
還是說(shuō)你把蛋白直接靜脈注射到血液了？腎臟又不是血漿蛋白分解的主要場(chǎng)所，為啥會(huì)在腎臟代謝？血漿里的一部分蛋白就是在肝 ...

不好意思是我沒(méi)說(shuō)清楚，我是通過(guò)靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的，按照理論來(lái)說(shuō)的話如果蛋白或者納米粒子很小的話一般是應(yīng)該通過(guò)腎臟-膀胱代謝的，不會(huì)留在肝臟里面，我在想是不是蛋白出現(xiàn)了二聚體，怎么檢測(cè)蛋白是不是二聚體呢？又或者怎么將二聚體的蛋白分開來(lái)

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4樓2022-06-22 11:39:19

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eric201212: 金幣+3 2022-06-23 21:32:55

引用回帖:

4樓: Originally posted by eric201212 at 2022-06-22 11:39:19
不好意思是我沒(méi)說(shuō)清楚，我是通過(guò)靜脈注射進(jìn)入小鼠體內(nèi)的，按照理論來(lái)說(shuō)的話如果蛋白或者納米粒子很小的話一般是應(yīng)該通過(guò)腎臟-膀胱代謝的，不會(huì)留在肝臟里面，我在想是不是蛋白出現(xiàn)了二聚體，怎么檢測(cè)蛋白是不是二聚 ...

蛋白如果可以隨意透過(guò)腎臟的話就出蛋白尿了，健康狀態(tài)下尿液中的蛋白很少的，而且尿中的蛋白分子量都較小。
二聚體檢測(cè)方法，可以做個(gè)尺寸排阻色譜可以看看，如果是二硫鍵介導(dǎo)的二聚體可以跑非還原膠。

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5樓2022-06-23 12:19:17

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