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biologic03新蟲 (初入文壇)
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[交流]
單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析
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隨著現(xiàn)代生物學(xué)的發(fā)展,“平均值”這個(gè)詞已經(jīng)不能滿足我們的研究需要了,我們需要更進(jìn)一步了解細(xì)胞之間的差異性,于是針對(duì)單細(xì)胞的各類研究技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。單細(xì)胞質(zhì)譜流式(Mass Cytometry)技術(shù)是利用質(zhì)譜技術(shù)對(duì)單細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)的流式技術(shù),它既有傳統(tǒng)流式細(xì)胞術(shù)能夠高速分析的特點(diǎn),又兼并了質(zhì)譜檢測(cè)的高分辨能力。 單細(xì)胞測(cè)序和質(zhì)譜流式都是目前非常強(qiáng)大的技術(shù),越來越多的高分文獻(xiàn)都是將兩者結(jié)合使用,兩者不能說有優(yōu)劣之分。區(qū)別在于質(zhì)譜流式針對(duì)蛋白進(jìn)行檢測(cè),能夠指定檢測(cè)蛋白,避免漏掉豐度很低但又很重要的蛋白,且質(zhì)譜流式技術(shù)因?yàn)槠渫肯喈?dāng)?shù)母撸梢詫?shí)現(xiàn)大量細(xì)胞的檢測(cè),都是對(duì)單細(xì)胞測(cè)序一個(gè)很好的補(bǔ)充。 百泰派克生物科技單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)采用金屬元素標(biāo)記物(通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體)標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞,再用電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,最后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。 單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)優(yōu)勢(shì): 1, 技術(shù)先進(jìn),填補(bǔ)技術(shù)空白 單細(xì)胞質(zhì)譜流式采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題?稍趩渭(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。 2, 分析數(shù)量大,成本較低 單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細(xì)胞匯總的分析 數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右,而流式質(zhì)譜技術(shù)一次(單樣本)就可分析至少10^5的細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高,且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。3, 應(yīng)用前景大 a) 流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景; b) 將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外,質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾; c) 可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。 [url=https://www.biotech-pack.com/singel-cell-mass-cytometry.html]的應(yīng)用 質(zhì)譜流式可做的功能分析可分為12類: (A) 表型表征 (B) 細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子測(cè)定 (C) 細(xì)胞內(nèi)信號(hào)狀態(tài)表征 (D) 細(xì)胞體積和尺寸測(cè)量 (E) 細(xì)胞活力鑒別 (F) 細(xì)胞周期鑒定 (G) 增殖示蹤 (H) 受體占有率測(cè)定 (I) 基于四聚體的抗原特異性T細(xì)胞篩選 (J) 染色質(zhì)修飾分析 (K) RNA 和蛋白質(zhì)共檢測(cè) (L) 成像質(zhì)譜流式細(xì)胞術(shù) 單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)在疾病研究、疾病治療中均有廣泛應(yīng)用,以新型冠狀病毒研究為例: |
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