 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3683 | 回復(fù): 8 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
labinnah金蟲 (正式寫手)
|
[求助]
AKK菌粉復(fù)蘇培養(yǎng) 已有2人參與
|
|
|
第一次做菌種復(fù)蘇，還是厭氧菌，完全小白一個。 買的CICC的akk菌（相較于ATCC的便宜），按說明書要求配制了巧克力血平板，同時也按照部分文獻參數(shù)配制了含L-蘇氨酸及N-乙酰-D-氨基葡萄糖的改良BHI液體培養(yǎng)基。將菌粉用無菌生理鹽水溶解后，各板/管加入50或100 uL菌液，平板涂布、試管混勻后分兩批，分別放入37℃厭氧產(chǎn)氣袋或厭氧培養(yǎng)箱中，到現(xiàn)在48h，只有一管BHI液體明顯渾濁，還有飄絮一樣的物質(zhì)。其余未見菌生長  想請教大家： 1.菌粉凍干管之前一直按說明書要求4℃保存，但距現(xiàn)在使用時已有3個多月，菌是否可能已死亡？ 2.說明書提示要用巧克力平板復(fù)蘇，按配方溶解瓊脂滅菌后，80-90℃加入無菌脫纖維羊血，繼續(xù)酒精燈上搖勻5min左右，但發(fā)現(xiàn)瓊脂內(nèi)部還是存在細微的血凝塊樣物質(zhì)（直徑≤1mm），不像有些巧克力血平板那樣質(zhì)地均勻，這個巧克力血平板是不是做翻車了？做了2批都是這樣 3.目前巧克力血平板表面未見菌落，但不知道有沒有菌膜生成，背景色太深看不清楚。操作時加的50或100uL菌是不是太多了？導(dǎo)致沒有單個菌落生成 4.說明書對時間說明有點籠統(tǒng)，只提到“菌種常規(guī)培養(yǎng)時間：細菌1-2天，酵母3天，霉菌5-7天，大型真菌 7-10天”，并未細化�？吹轿墨I提到用BHI培養(yǎng)基復(fù)蘇三至七天的都有，我目前培養(yǎng)時間48h是不是短了，得繼續(xù)等等看？但是萬一等到7天都沒有是不是就實錘翻車了？ 5.唯一的BHI渾濁飄絮可能是污染嗎？ 先謝過各路大佬了，求大佬翻牌，謝謝  |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
290求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
伙伴們，祝我生日快樂吧
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
281求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
工科278分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
考研一志愿長安大學(xué)材料與化工309分請求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
304求調(diào)劑（085602一志愿985）
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
0856材料與化工309分求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
282分材料專業(yè)求調(diào)劑院校
已經(jīng)有24人回復(fù)
-
材料工程085601調(diào)劑求老師收留
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
化工學(xué)碩306求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
明舟生物
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 331.4
- 帖子: 103
- 在線: 67.3小時
- 蟲號: 26553717
- 注冊: 2021-06-07
- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
labinnah8樓2022-04-18 09:27:51
testobio
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 294.5
- 帖子: 108
- 在線: 7.8小時
- 蟲號: 26485297
- 注冊: 2021-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
2樓2022-04-15 14:22:08
testobio
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 294.5
- 帖子: 108
- 在線: 7.8小時
- 蟲號: 26485297
- 注冊: 2021-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
|
做下鏡檢對比一下，菌株形態(tài)，或者送檢16s測序 https://www.jcm.riken.jp/cgi-bin ... amp;CN=&DN= |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
3樓2022-04-15 14:28:58
明舟生物
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 331.4
- 帖子: 103
- 在線: 67.3小時
- 蟲號: 26553717
- 注冊: 2021-06-07
- 專業(yè): 微生物資源與分類學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
labinnah: 金幣+200, ★★★★★最佳答案 2022-04-15 22:39:30
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
labinnah: 金幣+200, ★★★★★最佳答案 2022-04-15 22:39:30
|
買的CICC的akk菌（相較于ATCC的便宜），按說明書要求配制了巧克力血平板，同時也按照部分文獻參數(shù)配制了含L-蘇氨酸及N-乙酰-D-氨基葡萄糖的改良BHI液體培養(yǎng)基。 /CICC的菌種還是比較靠譜的，培養(yǎng)基推薦用 硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基(FT)，試劑商有成品銷售。剛開始不建議養(yǎng)這么難養(yǎng)的厭氧菌，先用金葡或者大腸練練手。 將菌粉用無菌生理鹽水溶解后，各板/管加入50或100 uL菌液，平板涂布、試管混勻后分兩批，分別放入37℃厭氧產(chǎn)氣袋或厭氧培養(yǎng)箱中，到現(xiàn)在48h， /AKK是嚴(yán)苛厭氧菌，所有接觸的水溶液最好都做驅(qū)氧處理，溶解氧會殺死菌株 只有一管BHI液體明顯渾濁，還有飄絮一樣的物質(zhì)。其余未見菌生長 /是否污染需要檢測，從培養(yǎng)時間上看不會是真菌污染，可以取部分菌液出來，反正非厭氧環(huán)境中觀察菌是否會繼續(xù)增殖或者死亡。 想請教大家： 1.菌粉凍干管之前一直按說明書要求4℃保存，但距現(xiàn)在使用時已有3個多月，菌是否可能已死亡？ /凍干粉狀態(tài)可以保存很久，十年八年死不了。 2.說明書提示要用巧克力平板復(fù)蘇，按配方溶解瓊脂滅菌后，80-90℃加入無菌脫纖維羊血，繼續(xù)酒精燈上搖勻5min左右，但發(fā)現(xiàn)瓊脂內(nèi)部還是存在細微的血凝塊樣物質(zhì)（直徑≤1mm），不像有些巧克力血平板那樣質(zhì)地均勻，這個巧克力血平板是不是做翻車了？做了2批都是這樣 /血平板可以找試劑商購買成品的，便宜還質(zhì)量可靠，比自己做劃算 3.目前巧克力血平板表面未見菌落，但不知道有沒有菌膜生成，背景色太深看不清楚。操作時加的50或100uL菌是不是太多了？導(dǎo)致沒有單個菌落生成 /涂布的話很難有單菌落生成，如果為了純化，請劃線來獲得單菌落。 4.說明書對時間說明有點籠統(tǒng)，只提到“菌種常規(guī)培養(yǎng)時間：細菌1-2天，酵母3天，霉菌5-7天，大型真菌 7-10天”，并未細化�？吹轿墨I提到用BHI培養(yǎng)基復(fù)蘇三至七天的都有，我目前培養(yǎng)時間48h是不是短了，得繼續(xù)等等看？但是萬一等到7天都沒有是不是就實錘翻車了？ /AKK是細菌，正常48小時就長好了，除非生長條件不合適�？梢栽俚鹊� 5.唯一的BHI渾濁飄絮可能是污染嗎？ /是否污染需要檢測，從培養(yǎng)時間上看不會是真菌污染，可以取部分菌液出來，反正非厭氧環(huán)境中觀察菌是否會繼續(xù)增殖或者死亡。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
4樓2022-04-15 14:57:58
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 【0856】化學(xué)工程（085602）313 分，本科學(xué)科評估A類院�；瘜W(xué)工程與工藝，誠求調(diào)劑 +4 | 小劉快快上岸 2026-03-11 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] （081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑 +9 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +3 | 搗蛋豬豬 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
[考研] 哈工大材料324求調(diào)劑 +6 | 閆旭東 2026-03-10 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +6 | 超級伊昂大王 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 呵唔哦豁 2026-03-10 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑材料專碩293 +6 | 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 求材料讀博院校 +9 | yanglei131 2026-03-08 | 9/450 |
|
|
|
[考博] 找博導(dǎo) +4 | 小呆呆熊 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 326 求調(diào)劑 +4 | 熱愛生活ing 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 295復(fù)試調(diào)劑
+4
|
簡木ChuFront 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 2026級碩士研究生招生/調(diào)劑 +3 | 知足常樂的樂 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703求調(diào)劑 +10 | c297914 2026-03-06 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑（0703）一志愿東北大學(xué) +5 | 好好- 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +8 | forgman95 2026-03-05 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料化工求調(diào)劑 +7 | 博斯特525 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 誠求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實習(xí)經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 不限學(xué)校專業(yè)的調(diào)劑同學(xué)看過來 +5 | 啊擺啊擺 2026-03-05 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +5 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|