欧美肯豆久久久久久精品免费,韩国r级日本一区二区三区,男人av天堂中文字幕

版塊導航: 正在加載中...

客戶端APP下載

論文輔導

調劑小程序

登錄注冊

應《網(wǎng)絡安全法》要求，自2017年10月1日起，未進行實名認證將不得使用互聯(lián)網(wǎng)跟帖服務。為保障您的帳號能夠正常使用，請盡快對帳號進行手機號驗證，感謝您的理解與支持！

24小時熱門版塊排行榜

返回列表

NanoFCMlxq

新蟲 (正式寫手)

應助: 0 (幼兒園)
金幣: 1017.6
帖子: 787
在線: 8.6小時
蟲號: 26342463

已領完

外泌體相關研究文獻分享,輕松讀完一篇文獻（十六）: 領取紅包 (小木蟲手機app專屬紅包)

掃一掃，下載小木蟲客戶端

今天分享一篇梅奧診所在預印本數(shù)據(jù)庫bioRxiv上的文章，名為《Programmable Modulation for Extracellular Vesicles》[1]（追蹤程序調控對外泌體分泌的影響）。

EV是細胞以一種非常保守的方式釋放的膜封閉結構。迄今為止測試的所有細胞類型都能產生EV。它們廣泛分布于血液、腦脊髓和其他體液中。EV在細胞之間攜帶生物活性分子，研究表明它們在病毒感染、癌癥擴散、自身免疫和神經(jīng)退行性疾病中具有生理和潛在的病理作用。EV通過旁分泌方式（向鄰近的靶細胞）和內分泌方式（向遠處的靶細胞）轉移其蛋白質、脂質和RNA。由于這些獨特的特性，EV相關的診斷和治療應用正在進行深入的研究。

EV的產生和釋放是一個受到嚴格調控的過程，在生理和病理條件之間發(fā)生變化。外部刺激可以很大程度改變EV的生產速率、含量或組成。然而，化學刺激缺乏特異性，而釋放的囊泡異質性很大。理想的治療性EV生產需要清潔和有效的監(jiān)管。

哺乳動物的大腦產生內源性連續(xù)電場活動，細胞外電壓小于0.5mV，電場電壓小于5mV/mm。外部電刺激，使用侵入性或非侵入性電極來針對選定的大腦區(qū)域，是一種新興的神經(jīng)調節(jié)療法。電壓范圍從0.5mV/mm~100mV/mm能夠預防甚至逆轉神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙，局灶性外部電刺激是FDA批準的治療多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療方法。其作用機制的理論是，神經(jīng)元活動可以被細胞外電刺激產生或阻斷，不同的頻率選擇性地影響不同的神經(jīng)元通路。有趣的是，許多電刺激療法報告在長時間尺度上提高了療效，如數(shù)月到數(shù)年。電刺激重塑神經(jīng)系統(tǒng)的機制尚不清楚。我們現(xiàn)在報道的研究表明，EV可能是治療性外部電刺激的介質。應用可編程的外部電刺激來控制EV及其內容物的釋放適用于許多細胞類型。

作為原理的證明，選擇研究星形膠質細胞，即中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中最豐富（比神經(jīng)元多4-5倍）和異質性的膠質細胞。它們與Ranvier、血管和其他膠質細胞類型的突觸相互作用使它們成為調節(jié)神經(jīng)元的最佳位置。已知的功能包括調節(jié)突觸連接、神經(jīng)元網(wǎng)絡的整合和同步，以及維持血腦屏障的完整性。它們通過升高細胞內鈣濃度來對低水平的電刺激作出反應。在最初的測試中，發(fā)現(xiàn)環(huán)境電刺激影響了原代培養(yǎng)的大鼠星形膠質細胞的EV釋放（圖1）。使用綠色熒光染料鈣綠素來監(jiān)測星形膠質細胞的細胞質體積和囊泡擠壓活性（方法和材料見補充1）。在電刺激(2Hz方波，脈沖寬度為0.1ms)時，在質膜上觀察到外出芽和囊泡脫落。圖1C顯示了電刺激期間釋放的EV的圖像。通過逐步降低100mV/mm來確定應用場強度。我們發(fā)現(xiàn)大多數(shù)細胞在高場強下被殺死，但在~5mV/mm以下，大多數(shù)細胞在電刺激下存活。該電場的大小在海馬體中神經(jīng)元產生的內源性電場的范圍內。

為了進一步確定電刺激波形對星形細胞EV釋放的選擇性影響，我們應用了三種不同頻率的相同強度(5mV/mm)電場，用于人類治療性腦電刺激，分別為2hz、20hz和200hz。事實上，這些頻率也可分為由人類顱內腦電圖(iEEG)記錄的三個內源性腦電波振蕩頻率、delta（0.5-4Hz）、-伽馬（>12-30Hz）和紋波（100-200Hz）。在這里，我們通過一個安裝在100mm培養(yǎng)皿(圖1A)上的定制裝置，對星形膠質細胞培養(yǎng)物進行電刺激，旨在在星形膠質細胞上產生均勻的電場，通過連續(xù)的液體交換來收集EV。

為了詳細表征EV，我們使用超濾結合尺寸排除色譜分離純化收集EV，然后使用納米流式檢測儀(N30納米流式檢測儀，NanoFCM)量化EV的大小和表面蛋白質（見補充1方法和材料）。在這種情況下，我們使用AlexaFlour488偶聯(lián)的AQP4特異性IgG單抗監(jiān)測星形細胞特異性水通道蛋白4(AQP4)(圖1D)。我們使用AQP4作為在不同刺激頻率下收集的星形細胞EV對應的粒子數(shù)量和大小的指標。在沒有施加電刺激的對照條件下，納米流式圖顯示了兩種不同大小的AQP4陽性EV的群體(圖1E)。

通常，EV根據(jù)囊泡直徑和釋放過程可分為三類：外泌體、微囊泡和凋亡小體。外泌體是通過內吞體多囊泡體的胞吐作用釋放出來的最小的囊泡(~50-100nm)。微囊泡，也稱為外小體(~100-1000nm)，是由質膜向外出芽和脫落產生的。凋亡細胞釋放凋亡小體(>1000nm)。我們將較小的囊泡解釋為外泌體，將較大的囊泡解釋為微囊泡。因此，我們得出結論，考慮到光學顯微鏡(>100nm)，我們在圖1C中電刺激培養(yǎng)的星形膠質細胞下產生的囊泡很可能是微囊泡。

在本實驗中，我們發(fā)現(xiàn)AQP4陽性EV的大小分布受到電刺激頻率的不同影響（圖2）。2hz刺激產生的EV分布接近均勻，尺寸分布峰值在~70nm，與沒有電刺激收集的假定外泌體群體相比，略微向右移動（較大）。2Hz刺激產生的AQP4陽性外泌體的主要群體比基線時更明亮，這支持了2Hz刺激產生膜AQP4增加的外泌體群體的假設。與基礎條件下相比，20hz的刺激產生的大、小尺寸的EV更少，特別是更少的假定外泌體。200Hz的電刺激與2Hz的刺激效果相反。微囊泡大小的EV占主導地位(峰值大小分布在~170nm)，該群體也在膜AQP4中富集。

誘發(fā)EV的特征表現(xiàn)出復雜的變異范圍，這不僅取決于刺激的參數(shù)，還取決于星形膠質細胞培養(yǎng)的準備。我們測試了三個獨立批次的培養(yǎng)星形膠質細胞，其制備的方法略有不同。盡管在準備和對ES的反應上有一些差異，我們調查了外泌體和微囊泡釋放（其他數(shù)據(jù)見補充2）。電刺激下微囊泡增加(p<0.05)，但外泌體在不同頻率下表現(xiàn)出更多變的效應。在不同條件下制備的細胞對外部電刺激反應的這種變化表明了未來使用電刺激進行精確治療的潛力（見后面的討論）。

RNA內容物是EV的一個重要特性。已知許多類型的應激會增加EV中包含的小的非編碼RNA。因此，我們預計星形膠質細胞對低振幅電刺激的細胞反應可能會影響EV包裹的miRNA。我們采用了一種無偏不倚的方法來研究電刺激頻率對miRNA譜的影響，通過使用RNAseq來識別EV miRNA的任何變化。我們分別從2Hz、20Hz和200Hz電刺激下施加均勻電場(5mV/mm)收集的純化EV中提取RNA，利用逆轉錄技術將其轉化為cDNA文庫進行高通量測序。RNA-seq結果總結在維恩圖（圖3）中，詳細信息列在表1中。我們共鑒定了89個miRNA。在四種條件下收集的每個EV樣本中識別的miRNAs數(shù)量為：無電刺激，32個miRNAs；2Hz刺激，45個miRNAs；20Hz刺激，65個miRNAs和200Hz刺激，67個miRNAs。所有四組中均存在21個miRNAs，在沒有電刺激的對照組中占66%，2Hz組占47%，20Hz組占32%，200Hz組占31%�？偣灿�14種miRNA與電刺激特異性相關，而與刺激頻率無關。然而，所研究的三種電刺激頻率中的每一種都有一組獨特的miRNA。

總之，我們已經(jīng)證明了從培養(yǎng)的大鼠星形膠質細胞中釋放的EV的數(shù)量、大小、表面蛋白和內容物受到電刺激頻率的選擇性影響。在基線（無電刺激）和在不同的電刺激條件下，培養(yǎng)的星形膠質細胞釋放EV的特征取決于星形膠質細胞培養(yǎng)的制備。我們已經(jīng)成功地測試了三批制備方法略有不同的培養(yǎng)星形膠質細胞。盡管實驗數(shù)據(jù)范圍有限，EV的釋放也有一定的變化，但我們的一般結論是，電刺激可以選擇性地調節(jié)EV的釋放。事實上，在不同的生理條件下，電刺激對細胞的不同影響表明，正常細胞和患病細胞對電刺激的反應會不同。未來的方法可能只針對病變細胞，對正常細胞的影響較小，甚至沒有影響。

在未來，我們還需要研究電刺激對脂質和其他星形細胞特異性蛋白的影響，如谷氨酸轉運體和內向整流的鉀通道。然而，從這項初步研究中出現(xiàn)的關鍵點是，電刺激為EV及其內容物的可編程調控提供了一種純凈的物理方法，這可能在生物科學和醫(yī)學應用中產生廣泛的影響。

我們報告的觀察結果也提出了關于外部和內源性電調節(jié)EV釋放的機制的有趣問題。首先，觀察到的效應可能代表了一種基本現(xiàn)象，即可能與原始單細胞生命形式對外部電場的反應有關。這可能對哺乳動物大腦的大規(guī)模電活動可能發(fā)揮的生物學作用很重要。腦電圖(EEG)顯示了大腦內源性電活動的幾個頻帶：（1-4Hz）、（>4-8Hz）、（>8-13Hz）、（>13-30Hz）、低伽馬（>30-70Hz）、高伽馬（>70-150Hz）和快速漣漪（>250-600Hz）。我們認為，局部場電位通過觸覺耦合調節(jié)單個神經(jīng)元的峰值時間。在哺乳動物的腦電圖中觀察到的最顯著的變化之一發(fā)生在從清醒狀態(tài)到睡眠的過渡期間，在那里腦電圖活動變化到更高的振幅和低頻率。電活動和行為狀態(tài)的同時變化可能會影響被釋放的EV及其內容物的組成。我們的研究表明，內源性細胞外電活性具有調節(jié)潛在的EV的釋放和內容物組成，以服務于各種生物和病理功能。

其次，我們的研究結果表明，一種生物學上監(jiān)測幾種神經(jīng)疾病的調節(jié)方法，如癲癇、睡眠和記憶功能障礙、腦腫瘤和帕金森病。經(jīng)驗表明，電刺激的頻率是治療特定神經(jīng)系統(tǒng)疾病的結果的關鍵決定因素。對于帕金森性和特發(fā)性震顫，高頻(>90Hz)可改善運動癥狀，但低頻率(<50Hz)要么無效，要么可加重癥狀。相比之下，在一些癲癇研究中，低頻刺激(<3Hz)安全有效地減少癲癇發(fā)作。頻率依賴性電刺激治療成功的機制仍在很大程度上是未知。監(jiān)測腦腦脊液、血清或間質液（透析）中的EV譜可提供優(yōu)化電刺激的生物標志物治療，以獲得更好的臨床結果。

第三，研究結果提出了一種在體外通過調節(jié)電刺激參數(shù)來生產攜帶所需藥物的治療性EV的方法。與制備EV的化學方法不同，電刺激是一種純凈的物理方法，具有幾個可調參數(shù)，包括振蕩頻率、場強和波形。

文章就分享到這里，有理解得不對的地方，歡迎專業(yè)人士指正，一起交流~

參考文獻：

bioRxiv preprint first posted online Mar. 3, 2019; doi: https://dx.doi.org/10.1101/566448.

發(fā)自小木蟲Android客戶端

回復此樓

» 猜你喜歡

伙伴們，祝我生日快樂吧已經(jīng)有4人回復
301求調劑已經(jīng)有3人回復
材料與化工304求B區(qū)調劑已經(jīng)有4人回復
讀博申請已經(jīng)有7人回復
一志愿江南大學085701環(huán)境工程專碩總分287求調劑已經(jīng)有5人回復
材料工程330分求調劑，一志愿985 已經(jīng)有5人回復
0856化工原理已經(jīng)有4人回復
一志愿安徽大學材料工程專碩313分，求調劑的學校已經(jīng)有9人回復
工科0856專碩化學工程269能調劑嗎已經(jīng)有9人回復
材料工程,326分，求調劑已經(jīng)有4人回復

» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼

1樓 2022-04-01 13:10:35

已閱回復此樓關注TA 給TA發(fā)消息送TA紅花 TA的回帖

簡單回復

柏拉圖之戀2樓

2022-04-01 13:19 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

tzynew3樓

2022-04-01 13:21 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

123456zmj4樓

2022-04-01 13:39 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

恒意賽teh5樓

2022-04-01 13:54 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

wyj9706樓

2022-04-01 13:56 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

秋土豆香7樓

2022-04-01 13:57 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

Guozongyan8樓

2022-04-01 13:58 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

lucky 69樓

2022-04-01 14:01 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

Jzhang21310樓

2022-04-01 14:11 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

bjdxyxy11樓

2022-04-01 15:06 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

chenhuanlong12樓

2022-04-02 00:17 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

somajason13樓

2022-04-02 09:21 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

云在青天14樓

2022-04-02 10:54 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

大小不點15樓

2022-04-02 23:03 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

nono200916樓

2022-04-02 23:58 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

rheolwjj17樓

2022-04-03 04:18 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

超超zzc18樓

2022-04-03 06:57 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

喵咪在哪19樓

2022-04-03 15:08 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

靜啊靜悄悄20樓

2022-04-06 17:39 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

Morann21樓

2022-04-12 15:22 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

李北車22樓

2022-04-12 15:39 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

jinchengzi23樓

2022-04-12 22:47 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

風夕兒24樓

2022-04-13 00:41 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

chen22222225樓

2022-04-13 10:36 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

155119526樓

2022-04-13 15:15 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲IOS客戶端

shanql0327樓

2022-04-13 15:40 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

趙趙趙趙28樓

2022-04-13 23:00 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

HZ071429樓

2022-04-18 15:34 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲IOS客戶端

清風扶醉月30樓

2022-04-18 16:07 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

瀾滄的愛31樓

2022-04-19 07:13 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

狂蟒之災32樓

2022-04-21 15:46 回復

NanoFCMlxq(金幣+2): 謝謝參與

已獲得2個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

lssure33樓

2022-05-04 23:40 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

40499163434樓

2022-05-05 10:09 回復

NanoFCMlxq(金幣+1): 謝謝參與

已獲得1個金幣發(fā)自小木蟲Android客戶端

相關版塊跳轉我要訂閱樓主 NanoFCMlxq 的主題更新

返回列表

最具人氣熱帖推薦 [查看全部]		作者	回/看	最后發(fā)表

[文學芳草園] 伙伴們，祝我生日快樂吧 +3	myrtle 2026-03-10	4/200	2026-03-11 17:49 by myrtle
[考博] 讀博申請 +5	感dd 2026-03-10	7/350	2026-03-11 17:02 by QGZDSYS
[考研] 279求調劑 +3	莫xiao 2026-03-10	4/200	2026-03-11 08:06 by 斬魂滴兔子！
[考研] 312求調劑 +5	陌宸希 2026-03-10	5/250	2026-03-11 07:18 by macy2011
[考研] 307求調劑 +6	超級伊昂大王 2026-03-10	6/300	2026-03-10 22:46 by 星空星月
[考研] 材料工程專碩調劑自薦信，初試323 +6	李白26 2026-03-07	6/300	2026-03-10 16:16 by 無際的草原
[考研] 材料與化工求調劑 +11	與冬清寧 2026-03-07	14/700	2026-03-10 14:23 by Linda Hu
[考研] 085600材料與化工 326 求調劑 +4	熱愛生活ing 2026-03-09	4/200	2026-03-10 08:25 by Linda Hu
[考研] 307求調劑 +3	辛仁豆腐 2026-03-08	5/250	2026-03-09 14:09 by macy2011
[考研] 【求調劑】293分環(huán)境工程求調劑材料/化工，服從調劑，抗壓能力強！ +13	xiiiia 2026-03-04	14/700	2026-03-09 14:06 by macy2011
[考研] 求調劑，一志愿江南大學，食品科學與工程，總分，320 +3	yyyyyukino 2026-03-07	3/150	2026-03-08 23:07 by 清風月
[考研] 346分材料求調劑 +5	snow_反季節(jié)版 2026-03-07	5/250	2026-03-07 22:40 by Leeding1356
[考研] 322分 085600求調劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國金及主持省級大創(chuàng)經(jīng)歷 +4	熊境喆 2026-03-05	4/200	2026-03-07 22:04 by 星空星月
[考研] 一志愿中國石油大學（華東）本科齊魯工業(yè)大學求調劑 +3	snw石 2026-03-07	3/150	2026-03-07 20:01 by houyaoxu
[考研] 一志愿211 085600 280數(shù)二英二求調劑 +3	月山斜 2026-03-06	3/150	2026-03-07 18:56 by houyaoxu
[考研] 材料專碩323求調劑 +5	李白26 2026-03-07	5/250	2026-03-07 16:46 by njzyff
[考研] 085600材料與化工 292分求調劑 +6	程晴之 2026-03-06	6/300	2026-03-07 09:22 by 斬魂滴兔子！
[考研] 求調劑 +4	呼呼？~+123456 2026-03-05	5/250	2026-03-06 23:15 by L135790
[考研] 材料277分求調劑 +13	飯飯星球 2026-03-04	14/700	2026-03-06 16:10 by @颯颯颯颯
[考研] 復試調劑 +5	呼呼？~+123456 2026-03-05	5/250	2026-03-05 19:43 by caszguilin

亭亭五月天在线观看,亭亭五月天在线观看,国产最新av一区二区,国产 高清 中文字幕,99re热久久亚洲综合精品成人,熟妇 一区二区三区,一级做a爰片性色毛片武则天,美女的骚穴视频播放,国产美女午夜免费视频

24小時熱門版塊排行榜

NanoFCMlxq

» 猜你喜歡

» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)

» 搶金幣啦！回帖就可以得到: 查看全部散金貼

亭亭五月天在线观看,亭亭五月天在线观看,国产最新av一区二区,国产高清中文字幕,99re热久久亚洲综合精品成人,熟妇一区二区三区,一级做a爰片性色毛片武则天,美女的骚穴视频播放,国产美女午夜免费视频

» 搶金幣啦！回帖就可以得到:

查看全部散金貼