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動物實驗CRO新蟲 (初入文壇)
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[交流]
蛋白免疫實驗類----單克隆抗體制備服務(wù)
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單克隆抗體(單抗)應(yīng)用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)將免疫動物的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞,通過HAT篩選,ELISA抗體檢測,有限稀釋克隆化,選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細胞的雜交瘤細胞,并產(chǎn)生抗體,就是單克隆抗體。 單抗的最大優(yōu)勢是它的特異性、均一性、高效性和無限供應(yīng)性。在免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)上,包括對疾病(包括癌癥)的診斷、預(yù)防和治療等方面,均顯示出巨大的生命力。 實驗流程: 1. 每種抗原免疫5只Balb/c小鼠 2. 選取ELISA效價較高的小鼠,取脾細胞與SP2/0細胞融合 3. 進行2~4次克隆化及ELISA篩選,確保雜交瘤細胞分泌抗體的穩(wěn)定性 4. 抗體亞類鑒定 5. 至少選擇2株雜交瘤細胞的凍存,并免費提供一年的保種服務(wù) 抗體的應(yīng)用 制備的抗體可能用于ELISA、WB、IHC、IP等實驗。 客戶需提供的材料及信息 1、客戶需要提供2mg以上的純化蛋白質(zhì),純度≥90%(SDS-PAGE檢測),若帶融合標簽需說明并提供篩選蛋白 2、如為多肽,客戶要提供兩種偶聯(lián)不同蛋白質(zhì)的多肽各4mg,未偶聯(lián)多肽1mg,偶聯(lián)多肽純度≥85% 結(jié)果提供 實驗報告 免疫前血清(20μl) 免疫后血清(20μl) 抗體上清(至少3株,1ml/株) 雜交瘤細胞(3株) 抗體亞型 如需要純化的客戶增加如下結(jié)果 純化抗體(3株)(純度≥90%,濃度≥1mg/ml,每株5mg) 免疫效價 抗體親和力常數(shù) 相關(guān)說明 A、免疫原可以為重組蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶聯(lián)小分子等。 B、客戶需要承諾外的細胞株,每株價格為500元。 C、客戶需要對承諾外的細胞株抗體進行純化。 D、如客戶需要非IgG類的其他細胞株。 |
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