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蛋白純化 已有1人參與
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昆蟲(chóng)表達(dá)二聚體,WB可檢測(cè)到,純化不出來(lái)是什么原因呢? @hc-material 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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首先,我不知道你的蛋白是分泌的,還是胞內(nèi)的。 其次如果是胞內(nèi)的,你需要看一下是不是可溶表達(dá)的。最好用超速離心分離裂解液的上清和沉淀,分別做WB。 最后WB的檢測(cè)較靈敏,在ng級(jí)別,如果表達(dá)量過(guò)少,使用原材料過(guò)少,是不是都會(huì)富集不到? 最后純化方式是什么?Ni柱純化豐度較低蛋白,特異性較差,可能觀察不到目標(biāo)蛋白條帶。。。可以通過(guò)WB考察Ni柱純化前后,Ni柱洗脫液的信號(hào)情況,觀察蛋白是否都掛柱了,是否在洗脫液中被富集了。來(lái)判斷純化方式是否有效 以上是經(jīng)驗(yàn)之談 |
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[基金申請(qǐng)]
剛錄用,沒(méi)有期刊號(hào),但是在線可看的論文可以放為代表作嗎
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arang1 2026-03-01 | 3/150 |
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[考研] 調(diào)劑 +3 | 簡(jiǎn)木ChuFront 2026-02-28 | 3/150 |
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[考研]
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LYidhsjabdj 2026-02-28 | 4/200 |
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