 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1668 | 回復(fù): 2 | |||
[交流]
多肽標(biāo)記和修飾 已有2人參與
|
|
目前多肽合成定制中，多肽標(biāo)記及多肽修飾的內(nèi)容非常多，常用的有N 端標(biāo)記或修飾、N 端熒光素修飾、光敏劑修飾、N 端脂肪酸修飾、C 端標(biāo)記或修飾、磷酸化標(biāo)記、二硫鍵成環(huán)環(huán)化、賴氨酸修飾、高氨基酸修飾、PEG修飾、單標(biāo)、雙標(biāo)、疊氮修飾、Mal修飾、N-Me修飾、偶聯(lián)等。廣泛應(yīng)用在多肽合成藥物、多肽生物學(xué)、多肽抗體以及多肽合成試劑的研究中。目前應(yīng)用廣泛的有：非放射性核素標(biāo)記（C13，H2，N15），熒光標(biāo)記（FAM，F(xiàn)ITC等），生物素標(biāo)記，磷酸化修飾等。 1. 多肽非放射性核素標(biāo)記 目前在多肽非放射性核素標(biāo)記中，使用廣泛的仍然是C13，N14，因為其使用安全，放射性小�，F(xiàn)在有比較完全的非放射性標(biāo)記的氨基酸，可以按照正常的多肽合成方法將標(biāo)記好的氨基酸直接連接到多肽上。 2. 多肽熒光標(biāo)記 多肽熒光標(biāo)記由于沒有放射性，實驗操作簡單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會伴有最后一個氨基酸的去除，但當(dāng)有一個間隔器如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的多肽從樹脂上切下來時，這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。 3. 多肽生物素標(biāo)記 生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system，BAS)，是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué)，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應(yīng)，并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP)，其中以BNHS最常用，當(dāng)然，也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記，因為其結(jié)構(gòu)上有個游離的羧基，采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合，由于生物素的溶解度低，使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。 4. 磷酸肽多肽合成 磷酸肽在生命過程中發(fā)揮重要作用，磷酸化的位置在多肽上的Ser，Thr，Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸，目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法，但是目前采用該方法合成磷酸化多肽也有缺點，特別是在合成多磷酸化多肽或氨基酸較長的多肽的時候，連接效率低，最后產(chǎn)品純度很低，對于這種磷酸化多肽，我們考慮采用后磷酸化方法，其合成過程就是在多肽合成結(jié)束后，選擇性脫去要標(biāo)記的氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基，對于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，而Ser可以采用Fmoc-Ser（trt），在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化，采用雙芐基亞磷酰胺，四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基上，隨后在過氧酸下氧化生成磷�；�，完成反應(yīng)。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
070300調(diào)劑一志愿南京大學(xué)化學(xué)專業(yè)，初試273分，有論文有專利有競賽，求調(diào)劑B區(qū)211
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國金及主持省級大創(chuàng)經(jīng)歷
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿鄭州大學(xué)，學(xué)碩，物理化學(xué)， 333求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿中石油，化學(xué)工程，301求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
0703化學(xué)求調(diào)劑，總分320分，一志愿中南民族大學(xué)
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
320材料與化工，求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿武漢理工大學(xué)-085602-總分296分-求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
286
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
070300化學(xué) 280 一志愿太原理工 求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
bambio
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 173.2
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 163
- 在線: 16.6小時
- 蟲號: 28363125
- 注冊: 2022-02-16
- 專業(yè): 化學(xué)生物學(xué)與生物有機(jī)化學(xué)
2樓2022-03-03 13:15:06
3樓2023-08-31 16:53:01
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 cctv1044 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +4 | 一個學(xué)習(xí)者 2026-03-04 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0855機(jī)械工程324求調(diào)劑 +3 | 鄭SK 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 學(xué)碩材料275調(diào)劑 +9 | 路三三 2026-03-03 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +6 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工，270求調(diào)劑 +14 | YXCT 2026-03-01 | 16/800 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 學(xué)家科 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿西工大材料學(xué)，英一數(shù)二總分321分，求調(diào)劑。 +3 | zz05zz 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | BrightLL 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料工程求調(diào)劑 +3 | 1431251 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[論文投稿]
通訊作者寫誰，問題是你意想不到的問題
 15+3
|
阿爾法啊 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +4 | Ricardo1113 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化工京區(qū)271求調(diào)劑 +7 | 11ing 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +10 | 人間唯你是清歡 2026-02-28 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學(xué)生 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | cgyzqwn 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料類求調(diào)劑 +11 | wana_kiko 2026-02-28 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | 南迦720 2026-02-28 | 10/500 |
|