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hyy3429新蟲 (初入文壇)
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VEGFR-2 western求助! 已有1人參與
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最近一個(gè)多月一直在跑huvec的vegfr-2蛋白,嘗試了很多條件,但是在230kda目標(biāo)區(qū)域一直沒(méi)有信號(hào)較強(qiáng)的目標(biāo)蛋白出現(xiàn),總是在75-100之間有明顯條帶,請(qǐng)問(wèn)大家有跑過(guò)這個(gè)蛋白的嗎~以下是我的跑蛋白條件: sds-page,8% ,4-12%預(yù)制膠,4-20%都試過(guò),sds-page時(shí)間 100V 90min 轉(zhuǎn)膜為濕轉(zhuǎn),嘗試過(guò)220mA 160min,240mA 150min,70V 150min,250 mA 120min 轉(zhuǎn)膜液甲醇濃度20%,10%,5%都試過(guò) 封閉液嘗試過(guò)碧云天,5%bsa,5%脫脂奶粉 一抗試過(guò)proteintech、CST,4度過(guò)夜 二抗室溫2小時(shí),ECL顯影 請(qǐng)問(wèn)問(wèn)題出在哪里呢?很多文獻(xiàn)中用的是原代huvec細(xì)胞,我用的是可以一直傳代的huvec,是這個(gè)原因嗎? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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這是VEGFR-2抗體的sci報(bào)道綜述,你可以直接查你買的抗體貨號(hào),點(diǎn)擊第一列貨號(hào)可以查看相應(yīng)的sci報(bào)道文獻(xiàn),建議參考文獻(xiàn)中的實(shí)驗(yàn)條件和結(jié)果。 https://www.labome.com/review/gene/human/VEGFR-2-antibody.html |
新蟲 (初入文壇)
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