 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 872 | 回復(fù): 6 | ||||
| 【有獎(jiǎng)交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機(jī)會(huì)分得作者 mxc137 的 10 個(gè)金幣 | ||||
mxc137新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
關(guān)于滾環(huán)擴(kuò)增的問(wèn)題求助
|
|||
|
我最近在做滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物與帶有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)的莖環(huán)序列雜交的實(shí)驗(yàn)，通過(guò)讓莖環(huán)打開(kāi)，來(lái)實(shí)現(xiàn)信號(hào)的放大。但是我試了很多辦法，幾乎檢測(cè)不到信號(hào)，甚至實(shí)驗(yàn)組比空白實(shí)驗(yàn)信號(hào)還要低。我檢查了序列配對(duì)，沒(méi)有任何問(wèn)題。而我通過(guò)讓莖環(huán)序列與它互補(bǔ)的單鏈結(jié)合，就會(huì)產(chǎn)生明顯的信號(hào)，證明莖環(huán)序列是沒(méi)有問(wèn)題的。 我覺(jué)得是莖環(huán)序列沒(méi)有與滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合上。 所以希望各位能給點(diǎn)建議或指導(dǎo)，是什么原因?qū)е碌倪@個(gè)問(wèn)題，或者說(shuō)大家有什么意見(jiàn)或者建議，感謝大家的幫助和指導(dǎo)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有242人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
pennchem
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +21 - MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 297 (大學(xué)生)
- 金幣: 10460
- 散金: 65
- 紅花: 28
- 帖子: 596
- 在線: 1100.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2139205
- 注冊(cè): 2012-11-21
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)
2樓2022-01-14 12:13:34
mxc137
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 57.8
- 帖子: 21
- 在線: 4.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 28074517
- 注冊(cè): 2022-01-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
|
結(jié)合上的話，熒光團(tuán)會(huì)遠(yuǎn)離猝滅團(tuán)，產(chǎn)生熒光信號(hào)。擴(kuò)增成功的表現(xiàn)是可以通過(guò)凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，觀察到有明亮條帶。目前是，有正確的條帶，但是加入莖環(huán)序列后經(jīng)過(guò)檢測(cè)沒(méi)有信號(hào)。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2022-01-14 14:41:46
pennchem
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +21 - MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 297 (大學(xué)生)
- 金幣: 10460
- 散金: 65
- 紅花: 28
- 帖子: 596
- 在線: 1100.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2139205
- 注冊(cè): 2012-11-21
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)
4樓2022-01-14 15:52:19
mxc137
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 57.8
- 帖子: 21
- 在線: 4.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 28074517
- 注冊(cè): 2022-01-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2022-01-14 16:03:10
pennchem
專家顧問(wèn) (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗(yàn): +21 - MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 297 (大學(xué)生)
- 金幣: 10460
- 散金: 65
- 紅花: 28
- 帖子: 596
- 在線: 1100.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 2139205
- 注冊(cè): 2012-11-21
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學(xué)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
如果是phi29的話，反應(yīng)溫度是30°C？ 探針和單鏈DNA結(jié)合也是這樣的溫度么？ 反應(yīng)體系中有沒(méi)有加入單鏈DNA結(jié)合蛋白？能否將反應(yīng)產(chǎn)物純化后，再加入探針看是否產(chǎn)生熒光？ 反應(yīng)是實(shí)時(shí)熒光（是不是觀察窗口期太短），如果是反應(yīng)結(jié)束后再加入探針觀察，有沒(méi)有可能反應(yīng)時(shí)間太長(zhǎng)，里面的單鏈已經(jīng)不是單鏈（非特異擴(kuò)增） 還有是否序列是否反過(guò)來(lái)了，探針和序列一致，而非互補(bǔ)（可能性很小，但也需排除） |
6樓2022-01-14 17:20:17
mxc137
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 57.8
- 帖子: 21
- 在線: 4.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 28074517
- 注冊(cè): 2022-01-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
|
溫度是相近的，不過(guò)沒(méi)有加入單鏈DNA結(jié)合蛋白，因?yàn)樾枰M(jìn)一步反應(yīng)，連接熒光序列。我在想，能不能在進(jìn)行進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)開(kāi)始時(shí)，加入熒光序列，會(huì)不會(huì)好一些。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2022-01-16 21:50:29
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 mxc137 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 售瀆SCI文章，我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +3 | ipys00zm58 2026-03-05 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿南京大學(xué)資源與環(huán)境專業(yè)283分求調(diào)劑 +4 | 追云?? 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
[考研] 085600材料工程一志愿中科大總分312求調(diào)劑 +10 | 吃宵夜1 2026-02-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +3 | 看看我. 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +6 | Bahati 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +7 | 夕～日 2026-03-05 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 化工282求調(diào)劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計(jì)算機(jī)、人工智能等專業(yè)的同學(xué)報(bào)考 +10 | pin8023 2026-02-28 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)085600 319分 材料與化工 金屬方向 求調(diào)劑 +6 | 青科11 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 一志愿中南大學(xué)理學(xué)化學(xué)
+6
|
15779376950 2026-03-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研]
0703化學(xué)學(xué)碩 288分
+4
|
旅行中的紫葡萄 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級(jí)已過(guò)，英語(yǔ)能力強(qiáng) +3 | 085700資環(huán)調(diào)劑 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 人間唯你是清歡 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動(dòng)297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +5 | kkcoco25 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研]
材料工程專碩283求調(diào)劑
 5+8
|
，！？ 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +11 | yunziaaaaa 2026-03-01 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)，材料，環(huán)境類求調(diào)劑 +7 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +6 | 愛(ài)擦汗的可樂(lè)冰 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 13853210211 2026-03-02 | 4/200 |
|