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蠔油生菜新蟲 (小有名氣)
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[求助]
基因克隆的引物設(shè)計(jì)問題
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| 新人求助，我要在提出來的全DNA組中克隆出一段目的基因，然后連接到質(zhì)粒上，我在primer 5上設(shè)計(jì)的一對(duì)引物兩邊直接加上了酶切位點(diǎn)，然后就p不出來?xiàng)l帶了，請(qǐng)問應(yīng)該如何解決 |
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新蟲 (初入文壇)
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可以試試先不加酶切位點(diǎn)擴(kuò)增連到T載體上，再以質(zhì)粒為模板用帶酶切位點(diǎn)的引物擴(kuò)增然后連目的載體；但是要注意T載體和目的載體的抗性盡量選擇不同抗性，這樣可以避免切膠回收這一步 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2022-01-07 11:57:28
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