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水溶C100pro新蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于血清瓶中培養(yǎng)基滅菌的幾個問題 已有1人參與
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關(guān)于液體培養(yǎng)基養(yǎng)厭氧菌的幾個求助問題: 前提:因為是厭氧操作,所以準(zhǔn)備用100mL血清瓶,培養(yǎng)基100mL,接種污泥5mL.培養(yǎng)基我分了母液A、B和C、D,A、B濃縮了10倍,需要高壓滅菌。C、D濃縮了100倍,需要過濾滅菌,培養(yǎng)基的pH要調(diào)至7左右。(之前完全沒接觸過微生物實驗,師兄師姐也沒進(jìn)行過厭氧培養(yǎng)基的滅菌) ①高壓滅菌過程中我需要只在血清瓶中分別加母液A、B 10mL,進(jìn)行高壓滅菌,還是加A、B和80mL純水。加了水我害怕血清瓶裝的太滿了,在滅菌過程中有隱患。但是不加水的話要將水單獨滅菌,那么需要在哪里將水轉(zhuǎn)移至血清瓶中才能保證不染菌呢?另外高壓滅菌后的后續(xù)操作要在哪里進(jìn)行,比如后續(xù)加過濾滅菌的母液C、D在哪里進(jìn)行(超凈臺?生物安全柜? ②血清瓶在滅菌過程中需要用橡膠塞和鋁蓋密封嗎?密封的話感覺高壓蒸汽進(jìn)不去,不密封的話要怎么弄咧? ③培養(yǎng)基最后要調(diào)pH,血清瓶瓶口很小,pH計插不進(jìn)去要怎么測pH? 感謝各位老板,祝各位早日發(fā)財!救救小白吧 |
新蟲 (正式寫手)
新蟲 (正式寫手)
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厭氧步驟:配好培養(yǎng)基,調(diào)好pH,封口 氮氣吹,加刃天青厭氧指示劑,吹到厭氧從藍(lán)色變粉紅色到無色,邊氮吹邊分裝到血清瓶,加橡膠塞鋁箔蓋密封,然后去滅菌。后面加藥劑用一次性注射器加, 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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