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happyaliii金蟲(chóng) (正式寫手)
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[交流]
如何將多肽溶解在DMSO中？
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二甲基亞砜（DMSO）是一種含硫有機(jī)化合物，分子式為C2H6OS，常溫下為無(wú)色無(wú)臭的透明液體。DMSO作為冷凍保護(hù)劑經(jīng)常應(yīng)用于細(xì)胞庫(kù)。在細(xì)胞冷凍過(guò)程中，DMSO可防止胞內(nèi)/胞外晶體的形成，其工作濃度為10%。DMSO通�？膳c鹽或血清白蛋白結(jié)合。 疏水性多肽可以很容易地溶解在DMSO中。但DMSO可增加細(xì)胞的通透性，若多肽溶解于DMSO中則會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用。高濃度的DMSO絕不可應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)中。濃度為5%的DMSO即可讓細(xì)胞膜溶解。大多數(shù)細(xì)胞株可以容忍0.5% DMSO，少許可以容忍1%的濃度，而不表現(xiàn)出嚴(yán)重的細(xì)胞毒性。然而原代細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)其更敏感。所以如果是用原代細(xì)胞做劑量/反應(yīng)曲線(可行性)，其濃度應(yīng)低于0.1%。 對(duì)于某些疏水性非常高的多肽，可先嘗試將其溶解在少量的DMSO(30-50ul,100%)中，然后慢慢 (一滴一滴地)將其添加到不斷攪拌的水溶液如PBS或其他想要的緩沖液中，直至理想濃度。如果滴加過(guò)程中，肽溶液開(kāi)始變渾濁，說(shuō)明已經(jīng)達(dá)到了溶解極限。另外，超聲波有助于多肽溶解。 經(jīng)驗(yàn): 對(duì)幾乎所有的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，濃度為0.1%DMSO是安全的。 廣泛被用于細(xì)胞培養(yǎng)的DMSO終濃度為0.5%，不會(huì)引起細(xì)胞毒性。 雖然對(duì)部分細(xì)胞來(lái)說(shuō)，1%DMSO也不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性，但我們推薦0.5%。 也有5%DMSO成功地應(yīng)用于某些細(xì)胞的案例。 始終保持終濃度在0.5%，但儲(chǔ)存時(shí)可200倍高濃度溶于100%的DMSO中。 |
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