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科研bxnb新蟲 (初入文壇)
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[交流]
糖原染色法，顯微鏡下的桃花源！
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PAS染色全稱為過碘酸雪夫氏染色（schiff periodic acid shiff, PAS），又稱糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。 染色原理 細(xì)胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基，其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色，沉積在細(xì)胞內(nèi)多糖所在之處。 染色步驟 組織石蠟包埋切片后脫蠟至水，蒸餾水洗2min（細(xì)胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）； 滴加過碘酸溶液，氧化5min； 蒸餾水洗10min； 滴加Schiff試劑，侵染10-20min； 傾去Schiff 試劑，流水沖洗10min； 滴加蘇木素染色液，染核1-2min； 流水沖洗5min； 酸性乙醇分化液分化； Scott反藍(lán)水洗3min； 常規(guī)透明、封片。 染色結(jié)果 PAS染色結(jié)果 糖原、多糖類物質(zhì)及其他PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)呈紫紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色。 注意事項 高碘酸溶液為透明溶液，配制后放4度冰箱備用，無法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞，需要定期更換； 染色試劑均應(yīng)低溫保存，臨用前半小時取出恢復(fù)室溫； Schiff染液染色時間可隨溫度調(diào)整，室溫高可減少染色時間，冬季室溫低，可延長至20 min左右。 |
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