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咸魚披薩新蟲 (小有名氣)
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關(guān)于酵母系統(tǒng)蛋白質(zhì)純化表達(dá)，載體以及表達(dá)細(xì)胞株選擇 已有1人參與
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有一個(gè)植物蛋白想要表達(dá)純化出來，是一個(gè)分泌型核酸酶，目標(biāo)是大量純化后再進(jìn)行功能檢驗(yàn)。 打算用真核酵母系統(tǒng)表達(dá)，因?yàn)榈谝淮巫龅鞍妆磉_(dá)，有很多問題。想問下： 1.載體應(yīng)該是選擇pPICZαA還是pPIC9k， 2.另外關(guān)于酵母感受態(tài)。應(yīng)該選擇GS115還是KM71， 3.還有目標(biāo)片段插入位置的選擇有什么講究， 4.目標(biāo)蛋白本身有信號肽，在插入時(shí)需要去除嗎 5.pPICZαA有HIS標(biāo)簽可以用于蛋白純化嗎，網(wǎng)上的pPIC9k-his也可以吧，現(xiàn)在糾結(jié)這兩個(gè)怎么選擇 后續(xù)在做的時(shí)候可能還有其他問題，希望能得到解答，謝謝@hc-material@gyesang |
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