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醫(yī)學生物科研銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
【動物實驗】大鼠胃的藥物吸收測定
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目的和原理 盡管胃不是藥物的主要吸收場所,還是有某些由胃粘膜吸收的報道,用大鼠胃痿技術直接測定胃的藥物吸收。 操作步驟 雄性 wistar大鼠.體重220~300g.50mg/kq戊巴比妥1.p.麻醉.頸靜脈插管.用以給予肝素化鹽水(30001U/kg) 和實驗過程中替換全血。實驗前立即從肝素化供血大鼠采集替換血，在頸動脈作另一插管,用以收集循環(huán)血液樣品。上腹部正中切口.注意結扎止血.用絲線結扎右側胃網(wǎng)膜動靜脈分支然后用絲線結扎胃和左肝小葉后韌帶.分離尾肝小葉 剪斷結扎冒脾系膜用紗布將肝小葉拖出手術野 用合話號碼縫線結扎胃血管和食管,然后結扎責門和賁門血管,前胃切口以使胃內(nèi)容物移出。 溫生理鹽水清洗胃痿 汲干液體。將一改良的帶卡口的三通接頭插人上述切口并結扎,用注射器經(jīng)三通給藥。將胃痿推至右位.暴露左胃靜脈.在其與牌靜脈交界處插管用21-gauge針頭與一條15cm長的聚乙烯管相連(內(nèi)徑.0.75mm.外徑.1.45mm)。用帶有泡沫橡膠的夾子夾住,以防操作時脫落。將藥物注入胃內(nèi).并在一定時間間隔內(nèi)由胃痿取血.測定血容積稱重并用血球容積器(HCT)指讀,并依公式轉換成單位。 總血重量(g) 容積(ml)= HCTX 血細胞密度 +(1- HCT)x 血漿密度 血細胞和血漿密度測定值由4只大鼠的五次測定獲得，血樣本于3000g離心10min:取自胃痿的血樣品放置冰上直至而漿可在3000g離心10min分離.血漿在分析冷凍前保存。以0.7 ml/min的速率置換血液.血液來自于用蠕動泵溫和振蕩的貯液器0.5m待試化合物注入胃痿。用特異檢測方法測定該化合物的血漿水平。在30~60min期問.每4min收集一次血漿樣品試驗結束后收集胃瘺內(nèi)液體測定胃內(nèi)藥物殘留量。 結果評價 計算4-6個實驗的血漿濃度的均值土SD.并圖示不同時間吸收狀況 |
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