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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲(chóng) (小有名氣)
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【動(dòng)物實(shí)驗(yàn)】1-甲基-4苯基-1，2，3，6-四氫吡啶（MPTP）模型
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MPTP及其模型簡(jiǎn)介： MPTP的毒性作用最早不是在動(dòng)物而是在幾位年青的吸毒者上發(fā)現(xiàn)的（Longston et a1. 1983）。 1979～1982年期間發(fā)現(xiàn)，一群有毒癮的加利弗尼亞年輕人，因吸食新合成的藥物而患上了嚴(yán)重的不可逆的PD，這些人出現(xiàn)了典型的PD癥狀，并且用L-DOPA及DA受體激動(dòng)劑治療有效。 分析新合成的藥物時(shí)發(fā)現(xiàn)，這種藥物不僅含有25％的1一甲基一4一苯基一4一丙酰氧基吡啶，而且還含2.9％的MPTP。隨后在不同動(dòng)物上均證實(shí)了MPTP導(dǎo)致PD的能力；生物化學(xué)和組織化學(xué)研究證明，MPTP引起的人的PD完全符合臨床所見(jiàn)PD所有的顯著特征；MPTP在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上可完全再現(xiàn)PD病人的各種癥狀，所以，MPTP處理的動(dòng)物可作為一種理想的PD模型（Ger1ach等， 1991; Tipton等， 1993）。 小鼠MPTP模型 在不同的小鼠品系中， C57 black（BL）/6對(duì)MPTP最敏感，且隨年齡增加而敏感性提高。MPTP導(dǎo)致的紋狀體DA的耗竭也引起小鼠行為學(xué)的改變（如運(yùn)動(dòng)障礙），這種改變對(duì)L一多巴的治療也引起反應(yīng)。然而，行為學(xué)的改變不甚明顯。 任何途徑給予MPTP都能在小鼠有效地產(chǎn)生DA的耗竭，但采用腹腔注射或口服需要MPTP的劑量較高。靜脈注射或皮下注射最有效。在神經(jīng)病理學(xué)的水平，MPTP似乎更易引起神經(jīng)末梢的損害，但較難引起神經(jīng)細(xì)胞的退化，至少全身應(yīng)用時(shí)是這樣。可能是由于這個(gè)原因，許多研究表明，小鼠紋狀體DA可隊(duì)詼復(fù)，盡管需要數(shù)月才能完全恢復(fù)。用TH免疫染色做為檢測(cè)DA能神經(jīng)細(xì)胞的標(biāo)志可能會(huì)導(dǎo)致某些誤解。所以，當(dāng)單用免疫染色這一技術(shù)就不能下結(jié)論認(rèn)為MPTP導(dǎo)致了神經(jīng)元退化。用Fink-Heimer染色或Nissl染色，加上細(xì)胞計(jì)數(shù)，對(duì)于這個(gè)目的可能更合適，盡管這些方法并不常用。 總之，MPTP的小鼠模型可用于較廣范圍的研究，尤其是MPTP作用機(jī)制的研究。然而，當(dāng)用于行為學(xué)或神經(jīng)病理學(xué)特征研究時(shí)，它就不是最好的模型。另一方面，因?yàn)樾∈笫軗p的DA神經(jīng)元可以恢復(fù)，這個(gè)模型可能很適用于神經(jīng)無(wú)可塑性與退化（regeneration）的研究。 操作步驟：成年C57 black (BL)小鼠，體重25~30g，自由進(jìn)食和飲水。照明晝夜交替。這些小鼠每天一次給予MPTP或生理鹽水腹腔注射，共3天。MPTP溶于0.9％鹽水， MPTP的劑量為30mg/kg，腹腔注射。 MPTP大鼠模型 MPTP形成神經(jīng)毒性的原因是在單胺氧化酶B（MAO-B）的作用下代謝成MPP+，后者被DA能神經(jīng)細(xì)胞所攝取后形成自由基，從而造成神經(jīng)細(xì)胞的死亡。盡管一些研究認(rèn)為大鼠由于缺乏MAO-B，不能使MPTP轉(zhuǎn)變成MPP+，因此無(wú)法破壞大鼠腦黑質(zhì)的DA能神經(jīng)細(xì)胞。但另外的研究卻發(fā)現(xiàn)MPTP也可使老年大鼠紋狀體內(nèi)的DA含量明顯下降。 操作步驟：Long一Evans品種大鼠，雌雄不拘，鼠齡21個(gè)月左右。將3MG？ KG的MPTP每隔24小時(shí)腹腔注射一次，連續(xù)8天。 |
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