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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 定量PCR服務
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醫(yī)學生物科研銅蟲 (小有名氣)
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熒光定量PCR服務 概述: 熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術,它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監(jiān)控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。 原理: PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步 前景: 實時熒光定量PCR的出現(xiàn),極大地簡化了定量檢測的過程,而且真正實現(xiàn)了絕對定量。多種檢測系統(tǒng)的出現(xiàn),使實驗的選擇性更強。自動化操作提高了工作效率,反應快速、重復性好、靈敏度高、特異性強、結果清晰。隨著生物芯片技術和熒光探針定量技術的結合,熒光定量PCR在醫(yī)學檢測及其他各個領域中的應用前景將更加廣闊,令人欣喜。盡管如此我們也應清晰認識到,FQ-PCR技術在我國各個研究領域的應用并不多見,這就需要我國學者迎頭趕上,使FQ-PCR技術更充分地推廣,以推動研究工作的快 |
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2樓2021-11-17 14:58:39
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3樓2021-11-17 14:59:39
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