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締一0601新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)胞支原體問題求助 已有2人參與
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| 不用實驗室方法,通過簡單的觀察,到底可不可以判斷細(xì)胞是否有支原體污染? |
版主 (著名寫手)
己所不欲,勿施于人

新蟲 (初入文壇)
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自行判斷的話,主要是這么幾個: 1、細(xì)胞生長緩慢甚至死亡:支原體的生長環(huán)境與細(xì)胞高度重合,一些支原體(包括最為常見的人型支原體、發(fā)酵支原體、精氨酸支原體等),通過精氨酸脫亞胺酶分解精氨酸來供能。當(dāng)這些支原體混入細(xì)胞培養(yǎng)體系后,會與細(xì)胞爭搶精氨酸,導(dǎo)致細(xì)胞「吃不飽飯」,出現(xiàn)營養(yǎng)不良的癥狀:生長速率異常、活力下降、易脫壁等等。而精氨酸又是細(xì)胞組蛋白的重要組成成分,缺乏精氨酸會嚴(yán)重影響組蛋白合成,引起染色體斷裂。再加上細(xì)胞處于長期饑餓的狀態(tài),最終導(dǎo)致細(xì)胞生長變慢甚至死亡。 2、細(xì)胞變形、碎片增加、易聚團、有小黑點:支原體通過黏附作用與細(xì)胞結(jié)合,獲取細(xì)胞膜表面的脂質(zhì)和膽固醇,破壞細(xì)胞膜的完整性,同時影響細(xì)胞間的信號傳遞。支原體會趁機侵入細(xì)胞,增加細(xì)胞中核酸內(nèi)切酶的含量,導(dǎo)致細(xì)胞染色體異常進而死亡。經(jīng)過支原體的這一番操作,細(xì)胞結(jié)構(gòu)已經(jīng)被嚴(yán)重破壞,隨之而來的就是細(xì)胞形態(tài)改變、細(xì)胞易聚團、大面積細(xì)胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培養(yǎng)基中的碎片和小黑點) 3、培養(yǎng)基易變黃:我們都知道,正常情況下,培養(yǎng)基中養(yǎng)分會逐漸耗盡,細(xì)胞代謝廢物會逐漸累積,上清液會變成黃色,因此要定期更換培養(yǎng)基。支原體也是如此——當(dāng)培養(yǎng)體系中感染了支原體并大量繁殖的時候,會向外排放代謝產(chǎn)物,影響體系中的PH,加快培養(yǎng)基變黃的速度。 綜上所述,如果你培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)上面這些情況,可以考慮一下是否出現(xiàn)支原體污染,通過支原體檢測試劑檢測一下,最終確定,賽多利斯、minerva biolabs這些都可以。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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