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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲 (小有名氣)
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【實驗經(jīng)驗】動物細胞培養(yǎng)中的問題與分析 已有1人參與
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動物細胞培養(yǎng)是生物學(xué)基礎(chǔ)實驗中的基礎(chǔ)，養(yǎng)不好細胞，后續(xù)的實驗都難以開展。而細胞培養(yǎng)中也時常會有各種狀況發(fā)生，例如細胞生長緩慢、細胞不貼壁等，那么它們可能的原因都有什么呢？讓我們一起了解下吧！ Q 細胞生長緩慢 可能原因： 1.培養(yǎng)液及培養(yǎng)方法有誤；更換不同培養(yǎng)液或血清也可能導(dǎo)致生長緩慢。 2.培養(yǎng)液中一些細胞生長必須成分如生長因子耗盡或缺乏。 3.培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染； 4.接種細胞起始濃度太低； 5.細胞老化； 6.支原體污染。 解決方法 1.檢查培養(yǎng)液和培養(yǎng)方法是否正確，比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液； 2.換入新鮮配置培養(yǎng)液，或補加生長因子； 3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，丟棄培養(yǎng)物； 4.增加接種細胞起始濃度； 5.換用新的保種細胞； 6.分離培養(yǎng)物，檢測支原體，如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。 Q 細胞不貼壁生長 可能原因： 1.支原體污染。 2.培養(yǎng)瓶瓶底不干bai凈。 3.培養(yǎng)液pH 值過堿（NaHCO3 分解）。 4.消化du液或培養(yǎng)液配制錯誤、過期儲存、儲存不當。 5.細胞老化（如傳代前細胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性）。 6.接種細胞起始濃度太低或太高。 解決方法： 1..縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度. 2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物. 3.注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶. 4.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無菌CO2（將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可）. 5.重新配置消化液或培養(yǎng)液. 6.啟用新的保種細胞. 7.調(diào)節(jié)最佳接種細胞濃度. Q 培養(yǎng)細胞死亡 可能原因： 1.培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2； 2.培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大； 3.細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷； 4.培養(yǎng)液滲透壓不正確； 5.培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積。 解決方法： 1.檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2； 2.檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度； 3.取新的保存細胞種； 4.檢測培養(yǎng)液滲透壓； 5.換入新鮮培養(yǎng)液。 MDL新升級了5000多平的科研樓，我們有活體成像、病理全掃、硬切、流式周期等，能夠滿足科研的基礎(chǔ)需求 |
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