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醫(yī)學(xué)生物科研銅蟲 (小有名氣)
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【百奧思科】骨質(zhì)疏松模型
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一：卵巢切除模型 (1)復(fù)制方法惟性實驗大角按40ma/ka體重的劑量經(jīng)腹腔注射2%Pentobarbital鈉麻醒無菌下腹部下中切目鞋性分離腹腳照 膜后進(jìn)腹絲線結(jié)扎卵巢并摘除�？p合切口前腹腔內(nèi)注入萬古霉素10萬u。造模后大鼠常規(guī)飼養(yǎng)自由飲水和進(jìn)食。 (2)模型特點卵巢切除后模型大鼠血漿雌激素(E2)含量顯著下降股骨中點骨皮質(zhì)指數(shù)也明顯下降,骨量和骨質(zhì)量也明顯下降。鏡下病理組織學(xué)觀察顯示骨組織切片中骨小梁斷烈排列稀疏形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性差。 (3)比較醫(yī)學(xué)骨質(zhì)疏松是臨床上老年人常見的疾病之一婦女絕經(jīng)后好發(fā)此病隨著絕經(jīng)后時間延長中老年婦女骨質(zhì)疏松發(fā)病 態(tài)口大幅度升表明陽里分沙的惟激素對骨質(zhì)院松的發(fā)生和發(fā)展有重要影響，大鼠去歸量后其體內(nèi)維激毒分沙減少.使其對破骨細(xì)胞的抑制減弱骨吸收大于骨形成骨骼呈高轉(zhuǎn)換狀態(tài)骨量不能保持平衡導(dǎo)致骨丟失增加。鏡下表現(xiàn)為骨小梁的面積下降、數(shù)量減少、分離度增加。以往研究表明年齡為3~9月齡區(qū)間的大鼠適合復(fù)制骨質(zhì)疏松模型尤其是6月齡大鼠已達(dá)峰值骨量，大鼠年齡過小機(jī)體內(nèi)因生長期骨量顯著增長會掩蓋去卵巢的骨量丟失而12個月齡后大鼠由于開始進(jìn)入老齡期機(jī)體內(nèi)會出現(xiàn)老年性骨量丟失從而影響實驗結(jié)果觀察。到目前為止采用卵巢切除大鼠復(fù)制的骨質(zhì)疏松模型是WHO和美國FDA推薦的研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的最佳模型。 二 ：維甲酸模型 (1)復(fù)制方法3個月齡雌性大鼠每天按70mg/kq體重的劑量口服維甲酸(retinoicacid)連續(xù)14d隨后14d維甲酸改為生理鹽水。動物常規(guī)飼養(yǎng)自由飲水及進(jìn)食，于造模開始后第29日處死動物取其脛骨于固定液中固定常規(guī)脫鈣石蠟包埋作連續(xù)切片光鏡下觀察。 (2)模型特點口服維甲酸3d后模型大鼠食量明顯減少至第14日時動物體重明顯減輕活動減少，并可見拱背豎毛。模型大鼠脛骨近心段松質(zhì)骨(骨小梁)骨量及形態(tài)發(fā)生明顯改變骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、密度顯著減少骨小梁間隙增大。模型動物骨組織切片形態(tài)計量結(jié)果顯示脛骨中段密質(zhì)骨面積百分?jǐn)?shù)也明顯減少骨髓腔面積百分?jǐn)?shù)增大反映破骨細(xì)胞活性與功能的骨內(nèi)膜面骨吸收周長百分?jǐn)?shù)明顯增高，本模型制作方法簡便造模時間短模型成功率高動物骨質(zhì)疏松表現(xiàn)典型易于開展給藥觀察 (3)比較醫(yī)學(xué)維甲酸是維生素A的衍生物具有與維生素A相似的藥理作用臨床上主要用于各種皮膚科疾病的治療但其伴有骨質(zhì)統(tǒng)松副作用。過去的研究表明維甲酸能激活機(jī)體內(nèi)破骨細(xì)胞促進(jìn)骨吸收但對成骨細(xì)胞活性無抑制作用對骨形成及骨基質(zhì)的礦化過程也無明顯影響最終使機(jī)體內(nèi)骨重建處于骨吸收大于骨形成的負(fù)平衡狀態(tài)從而導(dǎo)致動物出現(xiàn)骨質(zhì)疏松。本方法建立的骨質(zhì)疏松模型病理形態(tài)改變非常典型鏡下表現(xiàn)為骨小梁稀疏骨皮質(zhì)變薄骨髓腔擴(kuò)大但由于其造模機(jī)制方面的原因可引起模型動物性腺受損及脾臟、腎上腺發(fā)生代償性肥大所以其在研究的實用性方面不如卵巢切除方法建立的骨質(zhì)疏松模型。 三：可的松模型 (1)復(fù)制方法3月齡大鼠按3.6mq/kg體重的劑量經(jīng)口灌服氫化可的松注射液每周6次30d后改為每周2次。總給藥共60d。動物處死前10d和2d分別給大鼠皮下注射鹽酸四環(huán)素25mg/kg體重和Calein溶液30mq/kg體重的劑量使它們在骨表面形成熒光雙標(biāo)記以觀察2次注射期間骨形成的動態(tài)變化。 (2)模型特點 給藥結(jié)束時模型大鼠體重明顯降低骨組織切片鏡下觀察顯示骨小梁面積下降,骨小梁間隙增大,礦化沉積速率和骨形成率降低。 (3)比較醫(yī)學(xué) 復(fù)制糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松動物模型的機(jī)制主要是超生理劑量的皮質(zhì)類固醇激素可抑制機(jī)體成骨細(xì)胞活性使骨形成減少;同時引起機(jī)體的鈣:鱗、維生素D和甲狀旁腺素代謝的改變促進(jìn)骨吸收導(dǎo)致骨代謝處于骨吸收大于骨形成的負(fù)平衡狀態(tài)出現(xiàn)骨量丟失誘發(fā)骨質(zhì)疏松。本模型對研究人類糖皮質(zhì)激素引起的繼發(fā)性骨質(zhì)疏松有積極意義。 除了以上3種常用的骨質(zhì)疏松動物模型外尚有以下幾種特殊研究用途的骨質(zhì)疏松動物模型。1去睪丸大鼠模型:將4~6個月齡雄性大鼠去睪丸術(shù)后大鼠很快出現(xiàn)低骨量其原因是動物不能達(dá)到峰值骨量而不是雄激素缺乏所引起睪丸切除大鼠骨代謝轉(zhuǎn)換率升高骨質(zhì)疏松主要發(fā)生于松質(zhì)骨但經(jīng)雄激素補(bǔ)充治療后骨質(zhì)疏松病變可以逆轉(zhuǎn)。2制動性骨質(zhì)疏松模型:由于動物肢體的骨量和骨代謝與負(fù)重、肌力刺激、神經(jīng)血管對肌肉和骨的營養(yǎng)等因素密切相關(guān)。常用復(fù)制方法有機(jī)械固定法、懸吊法手術(shù)切除動物一側(cè)坐骨神經(jīng)或一側(cè)膝肌或跟腱等。由于制動導(dǎo)致骨質(zhì)疏松的機(jī)制不完全相同不能將一種制動模型的結(jié)果外推到其他煙型上，解險制動因表后母且通堂可恢復(fù)但所季時間較造模時間長但多，現(xiàn)主張在制動措型的基礎(chǔ)上加麗量切險 或睪丸切除進(jìn)行老年性骨質(zhì)疏松的研究前者模擬老年人體力活動減少,而后者模擬性腺功能豪退造成的骨質(zhì)疏松。 大鼠是人類骨質(zhì)疏松研究最常用的實驗動物,因為1大鼠有明顯的生長期和成年期便于觀察年齡對骨組織的影響。2骨骼系統(tǒng)的解剖與人類有很多相似之處。3成年大良的多個部位的松質(zhì)骨骨量在相當(dāng)一段時期內(nèi)保持穩(wěn)定,適宜于松質(zhì)骨重建的研究4與人類相似的松質(zhì)骨分布和重建功能及板層骨的骨小梁重構(gòu)能力。 |
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