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醫(yī)學生物科研銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
糖原染色法
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PAS染色全稱為過碘酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff, PAS),又稱糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。 染色原理: 細胞胞漿中存在糖原或多糖類物質(zhì)(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化為二醛基,其與Schiff試劑中的無色品紅結(jié)合后呈現(xiàn)紫紅色,沉積在細胞內(nèi)多糖所在之處。 染色步驟 1.組織石蠟包埋切片后脫蠟至水,蒸餾水洗2min(細胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗); 2.滴加過碘酸溶液,氧化5min; 3.蒸餾水洗10min; 4.滴加Schiff試劑,侵染10-20min; 5.傾去Schiff 試劑,流水沖洗10min; 6.滴加蘇木素染色液,染核1-2min; 7.流水沖洗5min; 8.酸性乙醇分化液分化; 9.Scott反藍水洗3min; 10.常規(guī)透明、封片。 糖原、多糖類物質(zhì)及其他PAS反應(yīng)陽性物質(zhì)呈紫紅色,細胞核呈藍色。 注意事項: 1.碘酸溶液為透明溶液,配制后放4度冰箱備用,無法從常規(guī)的顏色辨別高碘酸的好壞,需要定期更換; 2.染色試劑均應(yīng)低溫保存,臨用前半小時取出恢復(fù)室溫; 3.Schiff染液染色時間可隨溫度調(diào)整,室溫高可減少染色時間,冬季室溫低,可延長至20 min左右。 |

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