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| 【懸賞金幣】回答本帖問(wèn)題,作者Tiancccccc將贈(zèng)送您 20 個(gè)金幣 | ||
Tiancccccc鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
適配體和細(xì)菌的結(jié)合試驗(yàn)
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最近在做帶有熒光修飾的適配體和細(xì)菌的結(jié)合試驗(yàn),需要測(cè)定試驗(yàn)的Kd值。查閱文獻(xiàn)找到了兩種方法。 一種是直接測(cè)定結(jié)合后的熒光強(qiáng)度,然后利用熒光強(qiáng)度與適配體濃度作圖從而求出Kd值,公式是:F=Bmax*C/(Kd+C),但是我不清楚Bmax取什么值 第二種是流式,通過(guò)測(cè)定結(jié)合數(shù)來(lái)計(jì)算Kd,公式是y=Bmax*C/(Kd+C),Y是與適配體結(jié)合的細(xì)菌數(shù),C為適配體濃度,Bmax為特定適體的最大結(jié)合能力,我之前做的是流式的攝取,然后找不出來(lái)結(jié)合的細(xì)菌數(shù),如果想要通過(guò)流式做這個(gè)是需要怎么操作呢?然后這個(gè)的Bmax我也不知道取什么。 |
鐵蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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請(qǐng)問(wèn)博主這個(gè)是怎么擬合的呢,我最近也在做適配體Kd值,我是用SGI熒光實(shí)驗(yàn)做的,文獻(xiàn)中的擬合曲線是Y=(F-F0)*X/(Kd+X),然后Y的話文獻(xiàn)中說(shuō)是用(F-F0)/F0,總感覺有點(diǎn)怪怪的,大神能不能指點(diǎn)一下呢? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (小有名氣)
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