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myxmyhh銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化過(guò)程中破碎原因求助
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水稻黃化苗制備原生質(zhì)體成功后，加入質(zhì)�；靹蜱R檢沒(méi)問(wèn)題。 在加入40%PEG4000后，輕柔混勻時(shí)在管子中形成大塊類(lèi)似于藻類(lèi)的綠色不溶物沉淀，鏡檢發(fā)現(xiàn)原生質(zhì)體破碎 破碎的碎片黏在一起形成了上述沉淀，但實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的試劑都是課題組用過(guò)不存在問(wèn)題的，且PEG的濃度也對(duì)。 求助各位可能是什么問(wèn)題造成的原生質(zhì)體破碎。 本次實(shí)驗(yàn)跟之前的區(qū)別在于，這次使用了很多材料。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，原生質(zhì)體和雜質(zhì)都比較多，使用W5 buffer清洗一次后，在管中殘留200μl左右W5 buffer時(shí)加入1mL MMG溶液重懸細(xì)胞。 想請(qǐng)問(wèn)大家是否體系中雜質(zhì)太多也會(huì)導(dǎo)致加入PEG后細(xì)胞破碎？這是現(xiàn)在我能想到最有可能的原因。 |
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2樓2021-11-16 19:50:11
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3樓2022-06-20 23:54:42
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4樓2022-11-07 11:03:33
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